核内構造を介した神経特異的遺伝子クラスターの共制御発現機構

点击翻译按钮获取中文摘要

DNAトポイソメラーゼ (トポ )IIβはDNAの高次構造を変換する酵素で，私たちはトポIIβが一群の神経特異的遺伝子の発現を誘導，または抑制することを明らか にした.本研究では，トポIIβとゲノム上で共局在する因子であるhnRNP-U, CTCFに着目し， トポIIβによる神経特異的遺伝子の発現制御機構を明らか にすることを目的とする.トポIIβ，hnRNP-U，CTCFは，いずれもDNAにもRNAにも結合する活性がある. hnRNP-Uは，試験管内で，AT-richなS/MAR DNAに選択的に結合し，その結合にはN末に存在するSAPドメインが重要と考えられてきた．我々はhnRNP-U欠失変異体を用いてS/MAR DNA 結合活性を解析してC末に存在するRGドメインがS/MAR DNA 結合活性に重要であること，RGドメイン自体にS/MAR DNA結合活性があることを明らかにした．また，AT-rich DNAのminor grooveを認識するNetropsinが RGドメインのS/MAR DNA結合を選択的に阻害することから，RGドメインがAT-rich DNAのminor grooveを認識していることを明らかにした．RGドメインはRNA結合領域を含むことから，hnRNP-UのS/MAR DNA結合活性に対するRNAの効果を検証し，RNAが量依存的にhnRNP-UのS/MAR DNA結合活性を阻害することを明らかにした．細胞核内では，DNA,RNAが液―液相分離により機能的に分画されていることが予想されている．hnRNP-UのDNA/RNA結合活性がその制御に関わる可能性が示唆された(論文値投稿中)．