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Analysis of plant vacuolar trasnport system regulated by RAB5

RAB5调控植物液泡运输系统的分析

基本信息

批准号：
21K06222
负责人：
海老根一生
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06222/
关键词：
液胞輸送膜交通 RAB

项目摘要

液胞は植物の細胞の中でも貯蔵・分解・空間充填・浸透圧調節など多様な機能を担うオルガネラである。この多様な液胞機能を果たす為に、多くのタンパク質が液胞へと輸送されている。申請者は、モデル植物であるシロイヌナズナにおいて、液胞への輸送経路は少なくとも4つあり、それぞれの経路が異なるタンパク質を液胞へ輸送していること、中でも植物固有の液胞輸送経路が環境応答に関わることを明らかにしてきた。しかしながら、複数の液胞輸送経路にはどのような性質の違いがあるか、液胞輸送経路の多様化は植物において普遍的なものなのか、といった疑問が残されている。本研究課題では、シロイヌナズナを用いて液胞輸送経路の分子メカニズムを詳細に解析し、これを広範な植物種においても解析することで、植物の液胞輸送経路の分子メカニズムと保存性を明らかにすることである。本年度はエンドサイトーシス経路で機能する鍵因子であるRAB5およびRAB5の活性化因子であるVPS9aについて、共免疫沈降で単離された相互作用候補因子のうち、特にVPS9aタンパク質のリン酸化との関連について詳細な結合解析や細胞内局在解析、変異体を用いた詳細な解析を進めた。この他、異なる液胞輸送経路で運ばれることが期待される人工積荷タンパク質をシロイヌナズナに導入し、野生型および変異体における局在解析を進めたところ、一部のタンパク質において論文で報告されている局在パターンと異なる結果を得た。この原因として解析に使用している組織・細胞が異なることが原因である可能性を考え、現在細胞による局在異常パターンの詳細な比較を進めている。

Cell is the storage, decomposition, space filling, osmotic pressure regulation, and multiple functions of plant cells. The function of these multiple cells is to transport and transport multiple cells. The applicant is opposed to the plant's inherent cellular transport pathway, which is related to environmental protection. The diversity of the cellular transport channels is common in plants. This research topic is to analyze in detail the molecular structure of the cellular transport pathway in plant species, and to clarify the preservation of the molecular structure of the cellular transport pathway in plants. This year, the key factors of RAB5 and RAB5 activation factors were analyzed by VPS9a, co-immunoprecipitation factors were analyzed by VPS9a interaction candidate factors, and the relationship between VPS9a and RAB 5 activation factors was analyzed in detail by combination analysis, intracellular analysis, and heterogeneous analysis. In this paper, we report the results of artificial charge accumulation in different cell transport pathways. The reason for this is to analyze the use of tissue, cell, cause, possibility, present cell, abnormal situation, and compare them in detail.