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細胞接着の全胚スケールでの機能マッピングによる原腸形成メカニズムの解明

通过整个胚胎尺度细胞粘附的功能图谱阐明原肠胚形成机制

基本信息

批准号：
21K06258
负责人：
太田裕作
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Center for Novel Science Initatives, National Institutes of Natural Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

原腸形成のような大規模な細胞集団の3次元リモデリングは、細胞接着と細胞運動の２つの作用が精妙に協調することで成し遂げられている。本研究では、カドヘリンによって生み出される張力を測定する蛍光指示薬の開発をおこない、カドヘリンの張力・極性・発現量を可視化する機能マッピングを全胚スケールでおこない細胞運動との関係を明らかにすることを目的とする。令和4年度は、カドヘリンによって生み出される張力を測定する蛍光指示薬の開発に取り組んだ。本研究課題で開発する予定の蛍光プローブは、サンプルの動きによってアーティファクトが生じにくいFRET型レシオメトリックプローブである。これまでにゼブラフィッシュで使用実績が報告されている張力測定プローブをベースに計16種類の高性能FRET型張力測定プローブを作製した。作製したプローブを培養細胞に導入し、プローブの性能を評価した。このうちパフォーマンスが良かった4種のプローブをさらにゼブラフィッシュ初期胚に導入し本研究の目的が達成できる性能を有しているかを検証した。検証の結果、4種類のプローブすべてが目標の性能を満たしていなかった。そこで、ゼブラフィッシュでの使用実績が報告されていない高性能な張力測定プローブをベースに新たに32種類のプローブを作製し、これまでと同様の性能評価を行った。1種のプローブが目標を達成する性能を有していた。しかしながら、細胞毒性があるためかゼブラフィッシュの発生に有意な遅延が見られた。

Gastrulation, large-scale cell collection, 3-dimensional cell conjugation, cell adhesion The function of cell movement is exquisite and coordinated, and the function of cell movement is fine and coordinated. In this study, the tension and polarity of the tension and polarity of では、カドヘリンによって生み出される are measured using light indication 薬の开発をおこない・The actual amount of visualization is the function of the whole embryo and the movement of the cells. Reiwa 4 year は, カドヘリンによって生み出されるtension をdetermination する蛍光 instructs 薬の开発にtakingりgroup んだ. This research topic is based on the predetermined の蛍光プローブは, サンプルの动きによってアーティファクトが生じにくいFRET type レシオメトリックプローブである.これまでにゼブラフィッシュで use 実achiが report されているTENSION MEASUREMENT プローブをベースに 16 types of high-performance FRET type tension measuring プローブをした. Introduce the cultured cells into the system and evaluate the performance of the system.このうちパフォーマンスが好かった4 kinds of のプローブをさらにゼブラフィッシThe purpose of this study was achieved when the initial embryo was introduced and the performance was verified. The results of the certification, the performance of the four types of target, and the performance of the test.そこで、ゼブラフィッシュでの use 実achigが report されていない high-performance な tension measurement プローブをベースに新たに 32 types of のプローブを Manufacturer, これまでと同様のPerformance 価を行った. 1 type of performance that achieves the goal is achieved.しかしながら, cytotoxicity があるためかゼブラフィッシュの発生に有purpose な遅 Yanが见られた.