細胞接着の全胚スケールでの機能マッピングによる原腸形成メカニズムの解明

通过整个胚胎尺度细胞粘附的功能图谱阐明原肠胚形成机制

• 批准号: 21K06258
• 负责人: 太田 裕作
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Center for Novel Science Initatives, National Institutes of Natural Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06258/
• 关键词: ３D細胞トラッキング; 細胞運動; 細胞接着; 発生生物学; 初期発生; 蛍光イメージング; カドヘリン

原腸形成のような大規模な細胞集団の3次元リモデリングは、細胞接着と細胞運動の２つの作用が精妙に協調することで成し遂げられている。本研究では、カドヘリンによって生み出される張力を測定する蛍光指示薬の開発をおこない、カドヘリンの張力・極性・発現量を可視化する機能マッピングを全胚スケールでおこない細胞運動との関係を明らかにすることを目的とする。令和4年度は、カドヘリンによって生み出される張力を測定する蛍光指示薬の開発に取り組んだ。本研究課題で開発する予定の蛍光プローブは、サンプルの動きによってアーティファクトが生じにくいFRET型レシオメトリックプローブである。これまでにゼブラフィッシュで使用実績が報告されている張力測定プローブをベースに計16種類の高性能FRET型張力測定プローブを作製した。作製したプローブを培養細胞に導入し、プローブの性能を評価した。このうちパフォーマンスが良かった4種のプローブをさらにゼブラフィッシュ初期胚に導入し本研究の目的が達成できる性能を有しているかを検証した。検証の結果、4種類のプローブすべてが目標の性能を満たしていなかった。そこで、ゼブラフィッシュでの使用実績が報告されていない高性能な張力測定プローブをベースに新たに32種類のプローブを作製し、これまでと同様の性能評価を行った。1種のプローブが目標を達成する性能を有していた。しかしながら、細胞毒性があるためかゼブラフィッシュの発生に有意な遅延が見られた。

3-D coordination of protocol-forming, cell-joining and cell-moving processes This study aims to visualize the development, tension, polarity and amount of light indicating the development of cell movement in the whole embryo by measuring the tension of cell production. In order to determine the development of light indicator in the fourth year, the tension of light indicator shall be determined. This research topic is to develop a predetermined light source, such as a light source, and a light source. This is a report on the use of 16 types of high performance FRET type tensiometer. The performance of the cell culture was evaluated. The purpose of this study is to test the performance of four kinds of embryos. The results of the test, 4 types of tests, and the performance of the test results were analyzed. The performance of the 32 new types of tension measurement systems is reported in the report. 1. Performance It's a very, very, very,