甲殻類自律運動器官における自律メカニズムの転換機構

甲殻類の自律運動器官の自動性の源を調べるため、クルマエビ成体の心臓や腸管を用い自動性の発現機構を明らかにすることを目的として分子生物学的アプローチによる研究を主に進めた。昨年度までに収集した基礎データの解析を進めた。具体的には、クルマエビ成体を用いてターゲットとなる自立運動器官を含む代表的ないくつかの部位（心臓、消化管、筋肉、中枢神経系）より抽出したtotal RNAを混合したサンプルについて、RNAseq解析を行った。これらのアノテーション情報を付加したデータに関して、心臓の自律運動に関与しているHCN channel及び自律神経系に深く関与しているモノアミン関連の受容体について解析を行った。HCN channelに関しては、４つのトランスクリプトームがそれぞれ、Tribolium castaneum 2種類, Hyalella azteca, Penaeus vannameiらの動物種に対して一致度78％以上で高いホモロジーを持つことが示唆された。今後、これらの情報を元に保存性が高い配列を検討し、クローニング及び発現部位について検討を行う。また、心筋や腸管を構成する筋の活動を修飾するモノアミン類に関するレセプターについては、オクトパミン、ドーパミンおよびセロトニンのレセプターとみられるトランスクリプトーム情報で、既存のデータベースに対して高いホモロジーを持つことが示唆された。これらのうちDopamine like receptor2及びOctopamine receptor Beta-2R likeそれぞれについて、RT-PCRにより解析を行ったところ、ドーパミン様レセプターに関しては、腸において、強い発現が観察された。一方、オクトパミン様レセプターに関しては、中枢、筋肉、心臓にて発現が観察された事から、少なくとも、生体内に発現している事が示唆された。

甲殻類の自律運動器官の自動性の源を調べるため、クルマエビ成体の心臓や腸管を用い自動性の発現機構を明らかにすることを目的として分子生物学的アプローチによる研究を主に進めた。昨年度までに収集した基礎データの解析を進めた。具体的には、クルマエビ成体を用いてターゲットとなる自立運動器官を含む代表的ないくつかの部位（心臓、消化管、筋肉、中枢神経系）より抽出したtotal RNAを混合したサンプルについて、RNAseq解析を行った。これらのアノテーション情報を付加したデータに関して、心臓の自律運動に関与しているHCN channel及び自律神経系に深く関与しているモノアミン関連の受容体について解析を行った。HCN channelに関しては、４つのトランスクリプトームがそれぞれ、Tribolium castaneum 2種類, Hyalella azteca, Penaeus vannameiらの動物種に対して一致度78％以上で高いホモロジーを持つことが示唆された。今後、これらの情報を元に保存性が高い配列を検討し、クローニング及び発現部位について検討を行う。また、心筋や腸管を構成する筋の活動を修飾するモノアミン類に関するレセプターについては、オクトパミン、ドーパミンおよびセロトニンのレセプターとみられるトランスクリプトーム情報で、既存のデータベースに対して高いホモロジーを持つことが示唆された。これらのうちDopamine like receptor2及びOctopamine receptor Beta-2R likeそれぞれについて、RT-PCRにより解析を行ったところ、ドーパミン様レセプターに関しては、腸において、強い発現が観察された。一方、オクトパミン様レセプターに関しては、中枢、筋肉、心臓にて発現が観察された事から、少なくとも、生体内に発現している事が示唆された。