In vitro, in vivo functions and involvement in schizophrenia of lipid modifying enzyme that shows activity-dependent expression

显示活性依赖性表达的脂质修饰酶的体外、体内功能和参与精神分裂症

• 批准号: 21K06375
• 负责人: 原口 みさ子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06375/
• 关键词: zdhhc18; 統合失調症; 活動依存的; Zdhhc18; 遺伝子欠損マウス; ZDHHC18; 神経活動依存的遺伝子; パルミトイル化酵素

本研究は新規活動依存的パルミトイル化酵素遺伝子Zdhhc18の神経細胞、マウス個体における機能及び病態への関与の機構を明らかにすることを目的とする。研究実施計画としては令和3年度に①免疫染色により大脳中、あるいは神経細胞中でのZdhhc18の局在解析を行う。②培養神経細胞へのZdhhc18の強制発現による形態変化解析を行う③大脳発達段階におけるKO神経細胞の形態、伸長の解析を行う。④ 令和4年度からのKOマウスの行動解析の準備を行う。⑤令和5年度から統合失調症様症状の解析を行う。であった。①Zdhhc18の局在解析については種々のzdhhc18の抗体を用いた免疫染色法では明確なシグナルが得られなかった。タンパク発現が低い可能性が高い。②初代培養神経細胞にZdhhc18を強制発現させる実験を行い形態変化を観察した。樹状突起の数、複雑さに有意な変化はみられなかった。③ICRマウスの胎児脳にZdhhc18を誘導的に発現させ形態変化を観察した。蛍光が十分でなくコンストラクトを作成しなおしている。④Zdhhc18欠損マウスの大脳における神経回路形成や神経細胞形態を解析するため、妊娠15日の胎児の大脳に蛍光タンパク質レポータープラスミドをin utero electrophoresis (子宮内電気穿孔法)で導入した。結果を解析中である。⑤5Zdhhc18欠損マウスの作成を行い、6代目までバッククロスが終了し。ヘテロマウス同士の交配で野生型、欠損型マウス　雌雄各20匹づつ確保した。オープンフイールド試験、バーンズメイズ試験、プレパルス抑制試験、恐怖条件付け試験などの行動実験を行っている。①から⑤5はいずれも実験系を確立することができ局所解析以外は何らかの結果を得ることができると期待される。

The purpose of this study is to clarify the role of the enzyme gene Zdhhc18 in the regulation of activity-dependent neurogenesis, its individual function, and its pathological correlates. The study was carried out in the following three years: ① Immunostaining, Zdhhc18 analysis in neurons 2. Analysis of morphological changes during stress development of cultured neurons Zdhhc18; 3. Analysis of morphological changes and elongation of KO neurons during large-scale development.④ Order and 4 years of operation analysis and preparation (5) The analysis of symptoms of schizophrenia in order and 5 years.であった。①Zdhhc 18 antibody was detected by immunostaining method. The probability of occurrence is low and high. 2. The morphological changes of Zdhhc18 cells in primary culture were observed during the process of stress development. The number of tree protrusions and the number of compound protrusions are intentionally changed. 3. The development of ICR The light is very bright. 4. Zdhhc18 was introduced into the uterus by intrauterine electroporation (intrauterine electroporation). The results are analyzed. 5Zdhhc18 is in the process of making it, 6 generations are in the process of making it The wild type and the deficient type are 20 males and 20 females respectively. The operation of the test, the test 1. 5. The system is established, and the results are expected.