成体の神経筋接合部シナプスの維持におけるCcnファミリー因子の役割

Ccn家族因子在成人神经肌肉接头突触维持中的作用

• 批准号: 21K06392
• 负责人: 大河原 美静
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06392/
• 关键词: 神経筋接合部; 運動機能テスト; CTGF; Ccnファミリー因子

神経筋接合部(NMJ)は運動神経と筋肉を結ぶシナプスである。研究代表者は胎生期の神経筋接合部の形態形成と機能にCtgfがLrp4と結合し、Lrp4たんぱく質が細胞膜上に維持されることが必要であること報告した。Lrp4が胎生期だけではなく成体NMJの維持にも必要であることが分かっているため、本研究では、Ctgfやそれが属するCcnファミリー因子が同様にNMJの維持に必要であるかを検討した。令和４年度は、エレクトロポレーション技術を用いCtgf(Ccn2)遺伝子に対するshRNA(shCtgfとする) と同時にヒトCtgfの各ドメインのcDNAををCtgf+/-マウス前脛骨筋筋繊維に導入しCtgfの発現制御を行った。そして２週間後にこのマウスの①歩行時の筋力をCatWalk systemやビームテスト（網でできた橋を渡る際の踏み外すステップの数と速度を測定する）で評価し、それぞれの前脛骨筋の筋力と運動能力の評価を行う。次に、②前脛骨筋の筋繊維を繊維ごとに顕微鏡下でばらばらにし、それぞれの神経筋接合部の大きさや形態を免疫染色で確認後、Metamorphソフトウェアで測定・解析した。実験①②を行って検討した結果より、マウスCtgfは筋力を維持するために必要であり、CtgfのCTドメインが必要であることが明らかとした。CTドメインはCtgfの全長とは異なり神経筋接合部に集積することがなかったことから、CTドメインは神経筋接合部の機能を維持することには必要であるが、それだけでは神経筋接合部に集積することはできないことが明らかとなった

The tendon joint (NMJ) is used to exercise the muscles and muscles. During the fetal period, the representative of the study was able to use the Ctgf Lrp4 junction to form the mechanism, and Lrp4 to maintain the expression on the cell membrane, so as to report the necessary information. During the fetal period of Lrp4, it is necessary to maintain adult NMJ. In this study, Ccn and Ctgf are the same as those in NMJ. In the year 4, the Ctgf (Ccn2) sub-system shRNA (shCtgf equipment) was used to improve the quality of the technology. At the same time, the Ctgf was used in the same time that the bone tendons and tendons in the front of each cDNA were loaded into the Ctgf system. In the second half of the year, you will need to check the strength of the CatWalk system train, the speed meter, the speed test, the speed test, the speed test, In the second and second time, after the immunostaining of the joint of the tendon and the tendon was confirmed, the Metamorph test was analyzed and analyzed. In the end of 12 years, we need to make sure that the results are correct, that the Ctgf strength is necessary to maintain the necessary conditions, and that CTF is necessary to make sure that the results are clear. The whole length of the CT Ctgf joint can be maintained by the machine that can maintain the necessary equipment, the joint of the key tendon, the joint of the tendon, the joint of the rib, the joint, the joint.

项目成果

Zonisamide upregulates neuregulin-1 expression and enhances acetylcholine receptor clustering at the in vitro neuromuscular junction

• DOI: 10.1016/j.neuropharm.2021.108637
• 发表时间: 2021-06-19
• 期刊: NEUROPHARMACOLOGY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Inoue, Taro;Ohkawara, Bisei;Ohno, Kinji
• 通讯作者: Ohno, Kinji

Single-nucleus RNA-seq identifies transcriptional regulation of embryonic neuromuscular junction in skeletal muscle

单核 RNA-seq 鉴定骨骼肌中胚胎神经肌肉接头的转录调控

• 发表时间: 2022
• 作者: Kawachi Toshihiko;Masuda Akio;Yamashita Yoshihiro;Takeda Jun‐ichi;Ohkawara Bisei;Ito Mikako;Ohno Kinji;Bisei Ohkawara
• 通讯作者: Bisei Ohkawara