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Functional morphology of mice that can be visualized neuron-specific autophagy under stress

小鼠的功能形态可以可视化应激下神经元特异性自噬

基本信息

批准号：
21K06412
负责人：
田中雅樹
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

神経特異的なオートファジー活性可視化マウスの解析に取り組んでいる。既に研究室で作製して個体化した、syn1プロモーター下にニューロンに発現する、SYN1-GFP-LC3-RFPトランスジェニックマウスの脳組織発現についてまずは刺激を行わずに、脳全体について調べた。嗅球、線条体、海馬、橋核などにGFPを発現する細胞が出現した。大脳皮質や海馬でNeuNとの共存が見られるが、GFAPとの共存は見られず、これら発現細胞はニューロンであることが確かめられた。特に嗅球や海馬、線条体には軸索や樹状突起のような突起にGFPが出現し、RFPは主に細胞体に見られた。RFPは大脳皮質や海馬に発現があり、領域によって、ベースのオートファジー活性が異なることが示唆された。トランスジェニックマウスの初代培養細胞を用いた薬剤投与実験で、オートファジーを抑制するバフィロマイシンA1を投与するとGFP-LC3の凝集がみられ、オーファジーレセプターであるP62の凝集と共存が見られた。オートファジー活性化が進むと、理想的にはGFPとRFPの比が低下することになるが、実際オートファジー誘導剤である、リチウムを飲水に混ぜて1か月投与させると、海馬錐体細胞の細胞体、樹状突起でGFP/RFPが低下した。ただ、このトランスジェニックマウスの繁殖が野生型に比べると悪く、なかなかホモ接合体のマウスが生まれず、GFP-LC3やRFPの細胞内動態について、生化学的な評価を含めて、今年度詳細な検討を行う予定にしている。

The activity of the God's unique natator can be visualized using the analysis method of the group. It is produced by the research laboratory and is personalized, syn1 プロモーター下にニューロンに発成する, SYN1-GFP-L C3-RFP トランスジェニックマウスの organizational 発appears についてまずはstimulates を行わずに, 脳whole body について Adjusts べた. The olfactory bulb, linear body, hippocampus, and pontine nucleus all have GFP cells. The coexistence of large cortex and hippocampus, NeuN and との, and coexistence of GFAP and GFAPは见られず、これら発 appear cells はニューロンであることが正かめられた. Special features include the olfactory bulb and hippocampus, line body, axon and dendritic process, GFP appearance, and RFP main cell body. RFP is a large seahorse, a hippocampus, a field, and a field. Torotron's primary cultured cells are prepared with いた薬Invest in 実験で, オートファジーを suppress the するバフィロマイシンA1 is cast and coexists with the agglutination of GFP-LC3 and the agglutination of A1F-LC3.オートファジーactivationが enterむと, ideal にはGFPとRFPの比がlowerすることになるが, 実记オートファジーinducingである、リチウムを Drinking water にぜて1かmonthly injection and させると, hippocampal pyramidal cells の cell body, dendritic processes で GFP/RFP が low した.ただ、このトランスジェニックマウスの Breeding がWild type に比G FP-LC3's intracellular dynamics of RFP, biochemistry's evaluation, and this year's details will be determined.