Role of diencephalon and hypothalamus for pre-mating isolation among goby fishes

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営巣中のヨシノボリの雄に雌を提示した際、雌が雄に追従して巣に入った場合、雄は求愛様行動を示したとみなし、そのような行動が見られなかった場合、雄は威嚇様行動を示したとみなした。雄が雌の傍を離れた後、再び戻ってくるまでの時間を測定し、求愛様行動と威嚇様行動で時間の分布を比較した。その結果、求愛様行動では1.5秒以内に多く分布がみられるのに対し、威嚇様行動ではこの分布は有意に少なかった（カイ二乗検定）。雄が1.5 秒以内に雌の傍に戻ってきた回数を個体ごとに数え、雄が巣の外にいた時間で補正した結果、求愛様行動を示した雄（n=9）では平均1.043回/分、威嚇様行動（n=12）では平均0.078回/分であり、有意差がみられた（ウェルチ検定）。このことから、求愛中のヨシノボリの雄は雌の傍に執着する傾向があることが示唆された。次に、求愛された雌と威嚇された雌に視覚的な差異があるか調査した。雄に提示した雌を側面から写真撮影し、Fijiで画像解析を行った。胸鰭の基部背側端と尾鰭の基部中心を結ぶ線上の各ピクセルの輝度値を測定し、波形で示した結果、ピクセル幅が110を超えるピークの数（明るさ指数）が求愛雌（n=6）で威嚇雌（n=7）より有意に多かった（カイ二乗検定）。求愛雌の明るさ指数は1000ピクセル当たり平均1.18、威嚇雌では平均0.74だったが、有意差はみられず（ウェルチ検定）、体色の明るさは求愛の十分条件ではないと考えられた。一方、ピクセル距離から膨らみ指数（背腹の最長距離/肛門の位置の背腹距離）を算出した結果、求愛雌（n=10）は平均1.48、威嚇雌（n=8）は平均1.22で、有意差がみられた（ウェルチ検定）。膨らみ指数の高い威嚇雌もいたが、明るさ指数が低かった。以上のことから、ヨシノボリの雄は雌の視覚的特徴を複合的に判断し、配偶者選択の一つの指標としている可能性が示唆された。