多粒子結合イオン液体ナノ粒子を用いた超高感度電気化学発光イムノアッセイ法の開発

开发使用多颗粒结合离子液体纳米颗粒的超灵敏电化学发光免疫分析方法

• 批准号: 21K06523
• 负责人: 武上 茂彦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06523/
• 关键词: 電気化学発光; イオン液体; ナノ粒子; イムノアッセイ; リポソーム

本申請課題では、難治性疾患の診断において実用性のある超高感度電気化学発光イムノアッセイ（ECLIA）法を構築すべく、イオン液体ナノ粒子（ILNP）を複数個結合させた多粒子結合型ILNP（MPB-ILNP）の開発とMPB-ILNP－ECLIA法の生体試料への応用を目指すことを目的としている。2年目（令和4年度）は、1）ILNPの電気化学発光（ECL）挙動の解析、2）比較実験に用いる多粒子結合型リポソームでの定量性の検討、の2点をおこなった。1）について、まず金電極から炭素電極へと変更を余儀なくされたため、炭素電極へのアビジン（AVI）固定化の検討をおこなった。スクシニルイミド基をもつピレンを炭素電極に物理的吸着を介して固定化し、そこにAVIを反応させ固定化させた。ビオチン（BIO）修飾脂質を混合したILNPを用いて、AVI固定化電極と非固定化電極を比較すると、AVI固定化電極においてILNPのECLが大きかった。2）について、まず一定量のAVIが固定化された電極を用いて、リポソーム数の異なる多粒子結合型リポソーム（MPB-LIP）と1つのリポソーム（SIN-LIP）を滴下しECL測定をおこなった。その結果、リポソーム数が増加するにつれて有意にECL強度の増加が観測された。この結果より、多粒子化はECLの信号増幅に有用であることが示された。次いで、間接競合法を用いて、6つのリポソームが結合したMPB-LIPとSIN-LIPを滴下しECL測定をおこなった。その結果、MPB-LIPではAVI濃度が5～100 μMの間で定量性を示し、SIN-LIPよりも感度が10倍向上した。

the object of that present application is to construct an ultra-high sensitivity electro-chemical luminescence assay (ECLIA) method for the diagnosis of refractory disease, to develop a multi-particle bound ILNP (MPB-ILNP) by combining multiple ILNP with liquid ILNP, and to provide guidance for the use of MPB-ILNP-ECLIA method in the diagnosis of biological sample. 1) Analysis of electro-chemical luminescence (ECL) of ILNP; 2) Quantitative analysis of multi-particle binding system for comparison; 3) Analysis of ILNP's electro-chemical luminescence. 1) Immobilization of carbon electrode (AVI) Carbon electrodes are immobilized on the basis of physical adsorption. BIO modified ILNP was used in comparison with AVI immobilized electrode. 2) Immobilized electrodes with a certain amount of AVI, MPB-LIP, SIN-LIP, and ECL are used to determine the amount of AVI. As a result, the increase in the number of clean solutions was due to the intentional increase in ECL intensity. The result is that the ECL signal amplitude is increased. In addition, the indirect competition method is used in the middle, and the 6-bit solution is combined with MPB-LIP and SIN-LIP to determine ECL. The results showed that MPB-LIP was quantitatively sensitive to AVI concentrations ranging from 5 to 100 μM, and SIN-LIP sensitivity was 10-fold higher.

项目成果

Bortezomib is an effective enhancer for chemical probe-dependent superoxide detection.

• DOI: 10.3389/fmed.2022.941180
• 发表时间: 2022
• 期刊: Frontiers in medicine
• 影响因子: 3.9

疎水性イオン液体含有コルチゾールインプリントゲルの調製およびコルチゾール結合量の測定

疏水性离子液体皮质醇印迹凝胶的制备及皮质醇结合量的测定

• 发表时间: 2021
• 作者: 中條恵介;谷口深琴;松本侑季奈;小西敦子;武上茂彦
• 通讯作者: 武上茂彦

電気化学発光および水晶振動子マイクロバランス法の信号増幅のための多粒子結合型リポソームの調製

用于电化学发光和石英晶体微天平方法信号放大的多颗粒缀合脂质体的制备

• 发表时间: 2022
• 作者: 田中亜季;小西敦子;武上茂彦
• 通讯作者: 武上茂彦

京都薬科大学 分析薬科学系薬品分析学分野 研究内容

京都药科大学分析药学系药物分析学系研究内容

電気化学発光および水晶振動子マイクロバランス法における多粒子結合型リポソームの信号増幅効果の検討

电化学发光和石英晶体微天平方法中多颗粒结合脂质体信号放大效应的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Sugiura Daisuke;Okazaki Il-mi;Maeda Takeo K.;Maruhashi Takumi;Shimizu Kenji;Arakaki Rieko;Takemoto Tatsuya;Ishimaru Naozumi;Okazaki Taku;田中亜季，小西敦子，武上茂彦
• 通讯作者: 田中亜季，小西敦子，武上茂彦