メラノソーム輸送速度の比較から、分子モーター細胞内運動特性の謎に迫る
黑素体运输速度的比较揭示了分子马达细胞内运动特性的奥秘
基本信息
- 批准号:21K06748
- 负责人:
- 金额:$ 2.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
細胞内の分子や小胞、細胞小器官の多くは、細胞内物質輸送機構によって細胞内での局在が制御されている。輸送を駆動する蛋白質である分子モーターについては、その運動特性やそれに伴う分子の構造変化が多く研究されてきたが、細胞内において、多くの分子モーターがin vitro再構築系より高速に運動する理由はまだよく分かっていない。近年では、細胞内特有の分子混雑状況や非熱的な揺らぎとの関連が指摘されているが、本課題では、魚類と両生類の黒色素胞細胞(melanophore, melanocyte)を用い、メラノソーム輸送速度の違いに着目し、このような分子モーター特性の解明を目指す。本年度は、標的細胞へ分子モーターを含む輸送制御関連遺伝子(RMU(regulated motor unit))の導入と並行して、ゲノム編集の高効率化を図るため、特異的標的配列への結合を可視化するTALE及びCas9の蛍光プローブを複数作成し、結合能の検証を進めた。また、これらに加え、福島県立医大佐事博士らとの共同研究を進め、キネシン3ファミリーの1種であるKIF1Cのがん細胞中でのinvadopodia形成・伸長における挙動と制御機構を追求した。共同研究ではKIF1Cはc-Srcによるリン酸化を受けてMT結合能が活性化されることが示された。メラノソーム輸送においては、キネシン2の1種であるKIF3がメラノソーム拡散時の初期過程で一過的に活性化することが分かっており、これまでに一部のチロシン残基のリン酸化が重要であることを示唆する結果を得ている。今後は上記で得た知見を参考に、KIF3の運動特性を制御する機構に迫る。
Cell molecules, cell organelles, intracellular substance transport mechanisms, and intracellular control mechanisms The molecular structure of protein transport and its kinetic characteristics are studied in vitro and in vivo. The molecular structure of protein transport and its kinetic characteristics are studied in vitro and in vitro. The molecular structure of protein transport and its kinetic characteristics are studied in vitro. In recent years, the relationship between molecular mixing conditions unique to cells and non-thermal conditions has been criticized. This topic aims to clarify the use of fish and melanophore cells, the relationship between molecular mixing characteristics and transport speed. This year, the introduction and parallel processing of target molecules including RMU(regulated motor unit), high efficiency of target assembly, visualization of binding of specific target alignment, multiple generation of TALE and Cas9, and demonstration of binding energy have been advanced. A joint study by Dr. Kakuta and Dr. Fukushima Prefectural Medical Assistant has been carried out on the formation, elongation and control mechanism of invadodia in KIF1C cells. The joint study showed that KIF-1C was activated by MT-binding. One of the two species of KIF3 was activated during the initial phase of the transport process, and one of the two species of KIF3 was activated during the initial phase of the transport process. In the future, we will learn more about KIF3 motion characteristics and control mechanism.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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