分子間協働から創出される細胞容積調節能を利用した虚血性壊死からの救済策の開発

利用分子间合作产生的细胞体积调节能力开发缺血性坏死疗法

• 批准号: 21K06792
• 负责人: 沼田 朋大
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06792/
• 关键词: 細胞容積調節; TRPM7; LRRC8; VSOR

TRPM7とLRRC8の相互関連性を示唆するための機能解析をパッチクランプ法を用いて行いました。この実験から、外向き整流性を持つ非選択的にカチオンの透過性を持つTRPM7活性を阻害すると外向き整流性を持つアニオン選択性を持つLRRC8活性も抑制されることが明らかになりました。これにより、TRPM7活性を制御することで、LRRC8の活性制御が可能であるという仮説が立てられました。つまり、カチオンチャネルとアニオンチャネルの機能的カップリングがあることが分かりました。この仮説を確かめるために、DT40細胞株実験系を使用し、TRPM7の発現を一切なくすことができるTRPM7欠損細胞とTRPM7の欠損細胞に目的を持ったアミノ酸変異を施し、過剰発現をさせた細胞系を構築しました。アニオンとカチオンの2種類のイオンチャネル活性を、同時にリアルタイムで測ることができる実験系を構築し、TRPM7とLRRC8の関連性をより明確に実証しました。また、作成した細胞の低浸透圧刺激に応答する調節性容積減少能を測定することで、TRPM7が細胞容積減少のトリガーへの関与のみならず縮むフェィズにおいても間接的にかかわることを示しました。さらに、TRPM7-LRRC8の物理的相互作用を免疫沈降法や共局在を免疫染色法にて評価しました。そして、TRPM7活性変化による長期的なLRRC8を含む転写因子等の関連分子の増減をマイクロアレイによって確認しました。以上の実験により、TRPM7-LRRC8の機能連関が確認できた。最後に、虚血誘発性細胞膨大した細胞にTRPM7活性誘発LRRC8活性化させることで、RVDを引き起こし、壊死から救済するための策については、検討中です。この結果は新たな治療法の開発につながるだろうと考えています。

TRPM7 and LRRC8 are interrelated, and functional analysis is performed in the application. This is the first time that the company has been able to maintain the transparency of TRPM7 activity, the transparency of TRPM7 activity, and the transparency of TRPM8 activity. TRPM7 activity control is possible. LRRC8 activity control is possible.つまり、カチオンチャネルとアニオンチャネルの功能的カップリングがあることが分かりました。The expression of TRPM7 in cells of DT40 was studied. The relationship between TRPM7 and LRRC8 is clearly demonstrated by the establishment of a system for the detection of two types of cluster activity and simultaneous cluster activity. The regulatory capacity reduction of cells induced by low osmotic pressure can be measured by TRPM7. In addition, the physical interaction between TRPM7 and LRRC8 was evaluated by immunosedimentation and immunostaining. The activity of TRPM7 was determined by the long-term decrease of LRC8, including the increase of the related molecules such as the gene expression factor. TRPM7-LRRC8 function link confirmation Finally, TRPM7 activity induces LRC8 activity in cells that are deficient in blood. The result is that the new treatment method is developed.

项目成果

Search for intracellular signals affecting the activity of acid-sensitive outwardly rectifying anion channel (ASOR)

寻找影响酸敏感的外向整流阴离子通道 (ASOR) 活性的细胞内信号

• 发表时间: 2022
• 作者: Kaori Sato-Numata;Tomohiro Numata;Yasunobu Okada
• 通讯作者: Yasunobu Okada

BK Channels Are Activated by Functional Coupling With L-Type Ca2+ Channels in Cricket Myocytes

BK 通道通过与蟋蟀肌细胞中 L 型 Ca2 通道的功能耦合而被激活

• DOI: 10.3389/finsc.2021.662414
• 发表时间: 2021
• 期刊: Frontiers in Insect Science
• 作者: Numata Tomohiro;Sato-Numata Kaori;Yoshino Masami
• 通讯作者: Yoshino Masami

ハワイ大学 (米国)

夏威夷大学（美国）

ウズベキスタン大学(ウズベキスタン)

乌兹别克斯坦大学（乌兹别克斯坦）

Sigma-1 receptor is involved in modification of ER-mitochondria proximity and Ca2+ homeostasis in cardiomyocytes

Sigma-1 受体参与心肌细胞内质网线粒体邻近性和 Ca2 稳态的修饰

• DOI: 10.1016/j.jphs.2022.12.005
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences
• 影响因子: 3.5
• 作者: Tagashira Hideaki;Bhuiyan Md. Shenuarin;Shinoda Yasuharu;Kawahata Ichiro;Numata Tomohiro;Fukunaga Kohji
• 通讯作者: Fukunaga Kohji