新規修飾法による中和抗体に排除されないAAVベクターの開発と安全性の検討

使用新的修饰方法开发不会被中和抗体消除的 AAV 载体并研究安全性

• 批准号: 21K06823
• 负责人: 平本 貴史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06823/
• 关键词: AAVベクター; エクソソーム; 遺伝子治療

【本年度実施内容の概要】本研究は、エクソソームに内包したアデノ随伴ウイルスベクター（exoAAVベクター）表面を修飾することで、標的組織への感染効率の上昇、および特異性の向上を目的とする。本年度は、昨年度の結果を受けて選定したエクソソーム表面上の抗原の改変を行った。短い細胞外ループ構造と長い細胞外ループ構造で、それぞれ肝臓特異的修飾タンパク質を結合させることで、ベクター表面を修飾したexoAAVベクターを構築した。それぞれの細胞外ループ単独に修飾したベクター、および両方を修飾したベクターで、受容体強制発現細胞への感染効率を検討したところ、すべての修飾exoAAVベクターは、未修飾exoAAVベクターより高い感染効率を示した。また、それぞれの修飾法による違いは認められなかった。また、エクソソーム表面の別の受容体に着目し、CD19に対する単鎖抗体（scFV）でexoAAVベクター表面を修飾する方法を検討した。昨年度より検討していた方法と同様に、AAVベクター産生細胞の細胞膜を修飾することで、exoAAVベクター表面にscFVを発現するexoAAVベクターを作製することができた。また、scFV修飾exoAAVベクターを評価する系として、CD19抗原を発現する腫瘍細胞を樹立し、感染効率の検討を行った。その結果、scFV修飾exoAAVベクターは、未修飾exoAAVベクターと比較して高い感染効率を示すことが明らかになった。

[this year be applied content の summary 】 this study は, エ ク ソ ソ ー ム に insourcing し た ア デ ノ with accompanying ウ イ ル ス ベ ク タ ー (exoAAV ベ ク タ ー) surface を decoration す る こ と で organization, mark へ の unseen の infection rate rise, お よ び specificity の を purpose と upward す る. The けて results of this year and the <s:1> results of last year を were selected by けて for <s:1> antigenic <e:1> changes on the surface を lines った. Short い extracellular ル ー プ tectonic と long い extracellular ル ー プ tectonic で, そ れ ぞ れ routine liver specific modifications タ ン パ ク qualitative を combining さ せ る こ と で, ベ ク タ を ー surface modification し た exoAAV ベ ク タ ー を build し た. そ れ ぞ れ の extracellular ル ー プ 単 に alone to modify し た ベ ク タ ー, お よ び struck party を modified し た ベ ク タ ー で, body force 発 cells modern へ の infection rate of unseen を beg し 検 た と こ ろ, す べ て の modified exoAAV ベ ク タ ー は, undecorated exoAAV ベ ク タ ー よ り を high い unseen infection rate in し た. The modification method of また and それぞれ による による violates the rule of められな and った. ま た, エ ク ソ ソ ー ム surface の don't の let body に the mesh し, CD19 に す seaborne る 単 lock antibodies (scFV) で exoAAV ベ ク タ を ー surface modification す る method を beg し 検 た. Yesterday's annual よ り beg し 検 て い と た method with others に, AAV ベ ク タ の ー produce cell membranes を modified す る こ と で, exoAAV ベ ク タ ー surface に scFV を 発 now す る exoAAV ベ ク タ ー を cropping す る こ と が で き た. ま た, scFV modification exoAAV ベ ク タ ー を review 価 す る department と し て, CD19 antigen を 発 now す る swollen sores cells を し, infection rate of unseen の 検 line for を っ た. そ の results, scFV modification exoAAV ベ ク タ ー は, undecorated exoAAV ベ ク タ ー と compare し て を high い unseen infection rate in す こ と が Ming ら か に な っ た.