新規修飾法による中和抗体に排除されないAAVベクターの開発と安全性の検討

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【本年度実施内容の概要】本研究は、エクソソームに内包したアデノ随伴ウイルスベクター（exoAAVベクター）表面を修飾することで、標的組織への感染効率の上昇、および特異性の向上を目的とする。本年度は、昨年度の結果を受けて選定したエクソソーム表面上の抗原の改変を行った。短い細胞外ループ構造と長い細胞外ループ構造で、それぞれ肝臓特異的修飾タンパク質を結合させることで、ベクター表面を修飾したexoAAVベクターを構築した。それぞれの細胞外ループ単独に修飾したベクター、および両方を修飾したベクターで、受容体強制発現細胞への感染効率を検討したところ、すべての修飾exoAAVベクターは、未修飾exoAAVベクターより高い感染効率を示した。また、それぞれの修飾法による違いは認められなかった。また、エクソソーム表面の別の受容体に着目し、CD19に対する単鎖抗体（scFV）でexoAAVベクター表面を修飾する方法を検討した。昨年度より検討していた方法と同様に、AAVベクター産生細胞の細胞膜を修飾することで、exoAAVベクター表面にscFVを発現するexoAAVベクターを作製することができた。また、scFV修飾exoAAVベクターを評価する系として、CD19抗原を発現する腫瘍細胞を樹立し、感染効率の検討を行った。その結果、scFV修飾exoAAVベクターは、未修飾exoAAVベクターと比較して高い感染効率を示すことが明らかになった。