Mbd3によるPrimed型多能性幹細胞の維持と分化の方向性の決定機構の解明

Mbd3が欠失したmES細胞は、分化刺激を与えても未分化状態を維持し続ける。未分化状態での生体移植は奇形腫の要因になる事から、代表者はMbd3によるmES細胞への分化多能性の賦与機構を解明して来た。マウス着床後胚から樹立されたEpi幹細胞は、mES細胞(Naive型)よりもヒトES細胞(Primed型)との多くの類似点から、同型と区分されている。Primed型幹細胞においてもMbd3の機能解明を行なった結果、Mbd3はNaive型とPrimed型で役割及び分子作用機序が大きく異なっている事を示唆する先行データを得た。本研究では、Mbd3によるPrimed型多能性幹細胞の維持機構の解明を目指す。Primed型多能性幹細胞におけるMbd3の機能解析はほとんど報告がなされていなかった。そこで、Epi幹細胞におけるMbd3の機能を解明する為に、Mbd3欠失Epi幹細胞の表現型を調べた。ドキシサイクリン(Dox) の添加によってMbd3の発現を完全に消失できるMbd3欠失mES細胞を作製後、Mbd3 の発現を維持しつつEpi幹細胞を樹立した。Doxの添加によりMbd3の発現を消去したところ、幹細胞性が維持できず、分化することが示唆された。そこで、自動的な分化ではなく、三胚葉それぞれにプログラムされた分化を誘導したところ、Mbd3欠失Epi幹細胞は、内胚葉と外胚葉には分化できないが、中胚葉へ特異的に分化する事が見出された。

Mbd3が欠失したmES細胞は、分化刺激を与えても未分化状態を維持し続ける。未分化状態での生体移植は奇形腫の要因になる事から、代表者はMbd3によるmES細胞への分化多能性の賦与機構を解明して来た。マウス着床後胚から樹立されたEpi幹細胞は、mES細胞(Naive型)よりもヒトES細胞(Primed型)との多くの類似点から、同型と区分されている。Primed型幹細胞においてもMbd3の機能解明を行なった結果、Mbd3はNaive型とPrimed型で役割及び分子作用機序が大きく異なっている事を示唆する先行データを得た。本研究では、Mbd3によるPrimed型多能性幹細胞の維持機構の解明を目指す。Primed型多能性幹細胞におけるMbd3の機能解析はほとんど報告がなされていなかった。そこで、Epi幹細胞におけるMbd3の機能を解明する為に、Mbd3欠失Epi幹細胞の表現型を調べた。ドキシサイクリン(Dox) の添加によってMbd3の発現を完全に消失できるMbd3欠失mES細胞を作製後、Mbd3 の発現を維持しつつEpi幹細胞を樹立した。Doxの添加によりMbd3の発現を消去したところ、幹細胞性が維持できず、分化することが示唆された。そこで、自動的な分化ではなく、三胚葉それぞれにプログラムされた分化を誘導したところ、Mbd3欠失Epi幹細胞は、内胚葉と外胚葉には分化できないが、中胚葉へ特異的に分化する事が見出された。