表皮水疱症関連タンパク質Exophilin-5における細胞接着装置の制御機構

大疱性表皮松解症相关蛋白Exophilin-5细胞粘附装置的控制机制

• 批准号: 21K06866
• 负责人: 松永 耕一
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06866/
• 关键词: Rab27; Exophilin; 細胞接着; 表皮水疱症; 調節性分泌; 皮膚細胞

Exophilin-5の表皮細胞での役割とその分子メカニズムを解析するため、レンチウイルスを用いたshRNA発現により、安定にExophilin-5をノックダウンした表皮細胞株HaCaTを樹立した。Exophilin-5ノックダウン細胞では、細胞接着能は低下し、細胞遊走能は逆に促進することを見出した。さらにインテグリンα６β４抗体を用いた細胞染色を行い、細胞内局在を調べたところ、通常の細胞とは異なり、Exophilin-5ノックダウン細胞では、そのヘミデスモソーム局在が著しく減少していることがわかった。これらの結果から、Exophilin-5の欠損により、ヘミデスモソーム形成が阻害されることがわかった。さらにHaCaT細胞内で、Exophilin-5に特異的に結合するタンパク質の網羅的探索を行ったところ、細胞接着に関わるタンパク質が複数同定された。今年度は同定された新規結合タンパク質の解析を行った。さらにCRISPR/Cas9系を用いたExophilin-5ノックアウト細胞の樹立し、解析の結果、Exophilin-5がヘミデスモソーム形成だけでなく、他の接着装置形成についても重要な機能を有していることが明らかになった。

Exophilia-5 is expressed by shRNA in epidermal cells and is stable in epidermal cell line HaCaT Exophilin-5 can be seen in cells, cells, and cells. In addition, the expression of α6β4 antibody in cells was detected, and the expression of α 6β4 antibody in cells was detected. Usually, the expression of α 6 β 4 antibody in cells was detected. The result is that Exophilus-5 is deficient in damage and is resistant to damage. In HaCaT cells, Exophilin-5 is a specific binding agent for the detection of multiple binding agents. This year's new regulations combine quality analysis with quality analysis. The CRISPR/Cas9 system is used to establish and analyze Exophilus-5 cells, and the Exophilus-5 system is used to form a system. Other devices are used to form important functions.

项目成果

Cargo receptor Surf4 regulates endoplasmic reticulum export of proinsulin in pancreatic β-cells.

货物受体表面4调节胰腺β细胞中蛋白的内质网。

• DOI: 10.1038/s42003-022-03417-6
• 发表时间: 2022-05-13
• 期刊: COMMUNICATIONS BIOLOGY
• 影响因子: 5.9
• 作者: Saegusa, Keiko;Matsunaga, Kohichi;Maeda, Miharu;Saito, Kota;Izumi, Tetsuro;Sato, Ken
• 通讯作者: Sato, Ken

複数の Rab27 エフェクター Exophilins が制御する，インスリン顆粒開口放出機構

多个 Rab27 效应子 Exophilins 调节胰岛素颗粒胞吐机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 趙崑茘;松永耕一;水野広一;王昊;奥西勝秀;泉哲郎
• 通讯作者: 泉哲郎