新規Rabエフェクターexophilinファミリー蛋白質の生理機能

新型 Rab 效应外亲蛋白家族蛋白的生理功能

• 批准号: 15770117
• 负责人: 鳥居 征司
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770117/
• 关键词: 分泌顆粒; 輸送小胞; 開口放出; ヒト遺伝子疾患; GTP結合蛋白質

Exophilin family(exophilin1-8)と命名した蛋白質群は、その構造からRab27蛋白質との相互作用が推定される。そしてまたRab27aがGriscelli症候群の一原因遺伝子であることから、メラノサイト、細胞障害性Tリンパ球などの分泌顆粒の輸送・開口放出に関与することが推測される。まず、申請者が新たに同定した新規exophilinに特異的な抗体を作製し、各exophilin蛋白質の発現様式を検討した。続いて、試験管内で合成した各exophilin蛋白質といくつかのRab蛋白質との結合を解析したところ、いずれも効率良くRab27aあるいはRab27bと結合することが明らかとなった。またこの結合は、Rab27蛋白質のGTP依存的であることが分かった。これらのことから、新規exophilinはいずれもRab27のエフェクターであることが示唆された。Exophilin蛋白質はいずれも、N端にRab27との結合に関与することが予想されるcoiled-coil様領域を有している。この領域を欠くフラグメント、保存されたアミノ酸の一部を置換した変異体のコンストラクトを作製した。更には、exophilinの野生型および変異型蛋白質をメラノサイトなどの高次機能細胞に発現するために、アデノウイルスを作製した。これらを使った機能解析から、exophilin2は、Rab27aとともに内分泌顆粒の形質膜へのドッキングに関与していることが明らかとなった。この研究成果は、Journal of Biological Chemistryに発表した。更にexophilin3とexophilin4が同一の細胞に発現し、ともにRab27aのエフェクターであるという結果が得られた。

The Exophilin family(exophilin1-8)と names the た protein group が and そ <s:1> structure the らRab27 protein と <s:1> interaction が presumption される. そ し て ま た Rab27a が Griscelli syndrome の a reason but 伝 child で あ る こ と か ら, メ ラ ノ サ イ ト, cell handicap of T リ ン パ ball な ど の secretory granules の conveying, opening out に masato and す る こ と が speculation さ れ る. ま ず, new applicants が た に with fixed し た new rules exophilin に し, the different specific antibody を な exophilin protein の 発 presently others type を beg し 検 た. 続 い て, test tube で synthetic し た each exophilin protein と い く つ か の Rab protein と の combining analytical し を た と こ ろ, い ず れ も sharper rate good く Rab27a あ る い は Rab27b と combining す る こ と が Ming ら か と な っ た. The また また また binds to the <s:1> gTP-dependent である とが とが fraction of Rab27 protein った った. こ れ ら の こ と か ら, new rules exophilin は い ず れ も Rab27 の エ フ ェ ク タ ー で あ る こ と が in stopping さ れ た. Exophilin protein は い ず れ も, n-terminal に Rab27 と の combining に masato and す る こ と が to think さ れ る coiled coil - others fields を have し て い る. こ の field を owe く フ ラ グ メ ン ト, save さ れ た ア ミ ノ acid の a を replacement し た - variant の コ ン ス ト ラ ク ト を cropping し た. More に は, exophilin の wild-type お よ び - different protein を メ ラ ノ サ イ ト な ど の higher order functional cells に 発 now す る た め に, ア デ ノ ウ イ ル ス を cropping し た. こ れ ら を make っ た function analytical か ら, exophilin2 は, Rab27a と と も に の endocrine particles form plasma membrane へ の ド ッ キ ン グ に masato and し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. The research results of and the Journal of Biological Chemistryに show that た. More に exophilin3 と exophilin4 が same の cells に 発 し, と も に Rab27a の エ フ ェ ク タ ー で あ る と い う results ら が れ た.

项目成果

Functional analysis of Rab27a effector granuphilin in insulin exocytosis.

Rab27a 效应粒粒蛋白在胰岛素胞吐作用中的功能分析。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods Enzymol. 403
• 作者: Izumi T.;et al.
• 通讯作者: et al.

Rab27 effector granuphilin promotes the plasma membrane targeting of insulin granules via interaction with syntaxin la

Rab27 效应颗粒粒蛋白通过与突触蛋白 la 相互作用促进胰岛素颗粒的质膜靶向

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 279
• 作者: Torii S;et al.
• 通讯作者: et al.