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新規Rabエフェクターexophilinファミリー蛋白質の生理機能

新型 Rab 效应外亲蛋白家族蛋白的生理功能

基本信息

批准号：
15770117
负责人：
鳥居征司
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770117/
关键词：
分泌顆粒輸送小胞開口放出ヒト遺伝子疾患 GTP結合蛋白質

项目摘要

Exophilin family(exophilin1-8)と命名した蛋白質群は、その構造からRab27蛋白質との相互作用が推定される。そしてまたRab27aがGriscelli症候群の一原因遺伝子であることから、メラノサイト、細胞障害性Tリンパ球などの分泌顆粒の輸送・開口放出に関与することが推測される。まず、申請者が新たに同定した新規exophilinに特異的な抗体を作製し、各exophilin蛋白質の発現様式を検討した。続いて、試験管内で合成した各exophilin蛋白質といくつかのRab蛋白質との結合を解析したところ、いずれも効率良くRab27aあるいはRab27bと結合することが明らかとなった。またこの結合は、Rab27蛋白質のGTP依存的であることが分かった。これらのことから、新規exophilinはいずれもRab27のエフェクターであることが示唆された。Exophilin蛋白質はいずれも、N端にRab27との結合に関与することが予想されるcoiled-coil様領域を有している。この領域を欠くフラグメント、保存されたアミノ酸の一部を置換した変異体のコンストラクトを作製した。更には、exophilinの野生型および変異型蛋白質をメラノサイトなどの高次機能細胞に発現するために、アデノウイルスを作製した。これらを使った機能解析から、exophilin2は、Rab27aとともに内分泌顆粒の形質膜へのドッキングに関与していることが明らかとなった。この研究成果は、Journal of Biological Chemistryに発表した。更にexophilin3とexophilin4が同一の細胞に発現し、ともにRab27aのエフェクターであるという結果が得られた。

Exophilin family (exophilin1-8) named "protein group", "protein group", "Rab27 protein group", "presumptive protein" interaction. This is the first cause of Rab27aGrisceli syndrome. This is the first cause of Rab27aGrisceli syndrome. The first cause of this syndrome is that the children of Rab27aGrisceli syndrome are suffering from the disease, which is caused by the syndrome of Rab27aGrisceli syndrome. The antibodies of the new exophilin and the applicant were identified as antibodies, and the exophilin proteins were detected by Elisa. In the tube, the exophilin protein was synthesized, and the exophilin protein was synthesized. The Rab protein was used in combination with the analytical method. The rate of Rab27a protein was good and the Rab27b was good. The combination of Rab27 protein and GTP-dependent gene expression was analyzed in this study. The new exophilin rules do not show any signs of instigation or instigation. The new rules are called Rab27. There are significant differences in the fields of Exophilin protein, N-terminal Rab27, and coiled-coil. There is a shortage of information in the field, and you can save it in a way that makes you feel bad. In addition, the wild type of protein, the protein of the wild type, the protein of the wild type, the protein type, the protein type, the This makes it possible for the machine to analyze the size of the endocrine system, such as exophilin2, Rab27a, Rab27a, and so on, in the shape of the endocrine membrane. The research results are listed in the table of Journal of Biological Chemistry. The results show that the exophilin3 exophilin4 is the same as that in the same cell, and the results show that the results are good.