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全ての亜型のA型インフルエンザウイルスのHA蛋白質に保存される新規抗原部位の同定

鉴定所有亚型甲型流感病毒 HA 蛋白中保守的新抗原位点

基本信息

批准号：
21K07038
负责人：
山吉誠也
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Center for Global Health and Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

現行のインフルエンザワクチンを接種した場合、抗原性変化が起きやすいHA蛋白質のヘッド領域を認識する抗体が主に誘導される。そのため、流行株とワクチン株の抗原性が一致せず、ワクチンの有効性が著しく低下することがある。この問題を解決するため、抗原性変化が起こりにくい領域、つまり“異なる亜型のHA蛋白質の間で保存された領域”を免疫抗原として用いるワクチン、いわゆる次世代型インフルエンザワクチンの研究が世界的に進められている。本研究では、全ての亜型のA型インフルエンザウイルスのHA蛋白質を認識するヒトモノクローナル抗体の性状解析を行い、この抗体が認識する領域が新規抗原性保存領域であることを証明する。本年度は、まず本モノクローナル抗体のウイルス増殖抑制メカニズムの解析を行った。赤血球凝集抑制試験、ポリカリオン（シンシチウム）形成抑制試験、ウイルス放出抑制試験およびADCCレポーターアッセイによる評価を行い、抗体が保有する阻害効果を明らかにした。また、本抗体が認識するエピトープに対する抗体の保有率を、エスケープ変異を導入した組換えHA蛋白質と野生型HA蛋白質に対する反応性を比較することで調査した。本抗体が認識するエピトープをクライオ電子顕微鏡解析により明らかにするため、本抗体のFab領域を精製するとともに、三量体組換えHA蛋白質を準備した。準備したFab抗体が三量体組換えHA蛋白質に結合することが確認された。

In this way, we need to determine whether the HA protein can be conjugated and antigenicity changed. In this way, we will be responsible for the identification and identification of antibodies in the field. The antigenicity of the epidemic strain was consistent with that of the epidemic strain, and the antigenicity of the epidemic strain was similar to that of the epidemic strain. In order to solve the problem, antigenicity plays an important role in the field of HA protein preservation, immune antigen is used in the field of immune antigen, and the next generation is used in the field of research. The purpose of this study is to analyze the characteristics of antibodies, antibodies, antigenicity, antigenicity and antigenicity. This year, we will analyze the antibody antibody, colonization inhibition, and analysis of the disease. Hemagglutination inhibition, hemagglutination inhibition and antibody retention. This antibody was used to detect the retention rate of antibodies, HA protein, wild-type HA protein, wild-type HA protein, antibody retention rate, antibody retention rate and antibody retention rate. This antibody is sensitive to computer microanalysis, this antibody is used in the field of Fab, and the three-dose HA protein is prepared. Prepare to modify the Fab antibody triplex HA protein assay combined with the immune response assay to confirm the immune response.