Investigations of the molecular mechanisms by which the host factor MARCH8 shows a broad antiviral spectrum

宿主因子 MARCH8 显示广泛抗病毒谱的分子机制研究

• 批准号: 21K07060
• 负责人: 徳永 研三
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07060/
• 关键词: MARCH8; ウイルスエンベロープ糖蛋白質; シュードウイルス; 抗ウイルス活性; 宿主因子; エンベロープウイルス; 補因子

我々が以前報告した新規抗ウイルス宿主因子MARCH8のHIV-1 エンベロープ糖タンパク質（HIV-1 Env）に対する抑制効果について、由来する動物種別に検討した。サル（rhesus macaque）、マウス、およびウシMARCH8の野生型および2種類の変異体（RING-CH変異体、チロシンモチーフ変異体）を作製した。これらのHIV-1 Env抑制活性を検討するため、それぞれのMARCH8をHIV-1 Env欠損型ルシフェラーゼレポーターウイルスDNAとHIV-1 Env発現ベクターとともにヒト胎児腎細胞株293Tにコトランスフェクションして、産生されたウイルスの感染性を検討した。その結果、ヒトMARCH8と同様、サル、マウス、ウシMARCH8も、その野生型はHIV-1 Envに対する抑制能を保持しており、両変異体はどちらも抑制活性を失っていた。このことからMARCH8の抗HIV-1活性およびその機能領域は、動物種間で高度に保存されていることが明らかになった。また抗ウイルス活性を欠くMARCH3とMARCH8 のキメラを複数作製して実験を行った結果、MARCH8のN末端側およびC末端側の細胞質領域が重要であることが分かった。後者はMARCH3がC末のチロシンモチーフを持たないことに矛盾しないが、前者についてはMARCH3にもRING-CH領域があることからMARCH8のRING-CH特異的な抗ウイルス効果が考えられた。最後に、MARCH8を枯渇させたマクロファージと対照マクロファージにHIV-1を感染させた後、T細胞株と共培養して感染効率を比較した。その結果、両者に差は認められないことから、MARCH8はHIV-1の細胞－細胞間感染を抑制できないことが明らかになった。これは恐らくMARCH8がHIV-1 Envを細胞表面から完全に消失させることが出来ないためと考えられた。

I 々 が report before し た new rules anti ウ イ ル ス host factors MARCH8 の HIV - 1 エ ン ベ ロ ー プ sugar タ ン パ ク qualitative Env (HIV - 1) に す seaborne る inhibition of unseen fruit に つ い て, origin す る animal kind に beg し 検 た. サ ル (rhesus macaque), マ ウ ス, お よ び ウ シ MARCH8 の wild-type お よ び 2 kinds の - variants (RING - CH - variants, チ ロ シ ン モ チ ー フ - variants) を cropping し た. こ れ ら の Env inhibiting HIV - 1 active を beg す 検 る た め, そ れ ぞ れ の MARCH8 を Env owe damage HIV - 1 type ル シ フ ェ ラ ー ゼ レ ポ ー タ ー ウ イ ル ス DNA と HIV - 1 Env 発 now ベ ク タ ー と と も に ヒ ト fetal kidney cell line where 293 t に コ ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し て, produce さ れ た ウ イ ル ス の infectious を beg し 検 た. そ の results, ヒ ト MARCH8 と with others, サ ル, マ ウ ス, ウ シ MARCH8 も, そ の wild-type は HIV - 1 Env に す seaborne る can inhibit を keep し て お り, struck - variant は ど ち ら も inhibitory activity を lost っ て い た. こ の こ と か ら MARCH8 の HIV - 1 active お よ び そ は の function field, animal interspecies で highly に save さ れ て い る こ と が Ming ら か に な っ た. ま た resistance ウ イ ル ス active を owe く MARCH3 と MARCH8 の キ メ ラ を し the plural cropping て be 験 を line っ た results, MARCH8 の N terminal side お よ び C terminal side の cytoplasmic domain important で が あ る こ と が points か っ た. At the end of the latter は MARCH3 が C の チ ロ シ ン モ チ ー フ を hold た な い こ と に contradiction し な い が, the former に つ い て は MARCH3 に も RING - CH areas が あ る こ と か ら MARCH8 の RING - CH specific resistance な ウ イ ル ス unseen fruit が exam え ら れ た. Final に, MARCH8 を withered 渇 さ せ た マ ク ロ フ ァ ー ジ と polices according to マ ク ロ フ ァ ー ジ に を infected with HIV - 1 さ せ た, T cell lines after と trained し て infection rate of unseen を more し た. そ の poor results, struck に は recognize め ら れ な い こ と か ら, MARCH8 は の cell - cell infected with HIV - 1 を inhibit で き な い こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ は fear ら く MARCH8 が HIV - 1 Env を cell surface か ら に disappear completely さ せ る こ と が out な い た め と exam え ら れ た.

项目成果

MARCH8は様々なウイルスエンベロープ糖蛋白質の細胞質領域リジン残基を標的とする

MARCH8 靶向多种病毒包膜糖蛋白细胞质区域中的赖氨酸残基

結合型ユビキチンリガーゼRNF152によるチロシナーゼのユビキチン化分子機構解明に関する研究

共轭泛素连接酶RNF152阐明酪氨酸酶泛素化分子机制的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 上田亮太;大園誠也;藤井佑樹;高橋宏隆;竹田浩之;澤崎達也;本川智紀;徳永研三;藤田英明
• 通讯作者: 藤田英明

COVID-19とACE2

COVID-19 和 ACE2

• 发表时间: 2022
• 期刊: 腎と透析
• 作者: 多田卓哉;徳永研三
• 通讯作者: 徳永研三

MARCH8 Targets Cytoplasmic Lysine Residues of Various Viral Envelope Glycoproteins.

• DOI: 10.1128/spectrum.00618-21
• 发表时间: 2022-02-23
• 期刊: Microbiology spectrum
• 影响因子: 3.7
• 作者: Zhang Y;Ozono S;Tada T;Tobiume M;Kameoka M;Kishigami S;Fujita H;Tokunaga K
• 通讯作者: Tokunaga K

膜結合型ユビキチンリガーゼRNF152によるメラニン産生調節機構に関する研究

膜结合泛素连接酶RNF152调控黑色素生成机制的研究

• 发表时间: 2021
• 作者: Hasyim Ammar A.;Iyori Mitsuhiro;Mizuno Tetsushi;Abe Yu-ichi;Yamagoshi Iroha;Yusuf Yenni;Syafira Intan;Shahnaij Mohammad;Sakamoto Akihiko;Yamamoto Yutaro;Mizukami Hiroaki;Shida Hisatoshi;Yoshida Shigeto;上田 亮太，大園 誠也，藤井 佑樹，高橋 宏隆，竹田 浩之，澤崎 達也，本川 智紀，徳永 研三，藤田 英明
• 通讯作者: 上田 亮太，大園 誠也，藤井 佑樹，高橋 宏隆，竹田 浩之，澤崎 達也，本川 智紀，徳永 研三，藤田 英明