新規遺伝子Themisの核内機能解析

T細胞特異的に発現しているThemisの遺伝子座はヒトのセリアック病、アトピー性皮膚炎、潰瘍性大腸炎、関節リウマチなどの自己免疫疾患との関連が示唆されている。また、Themis欠損マウスでは成熟T細胞が激減しており、ThemisがT細胞の分化成熟や機能に重要な働きをしていることは明らかであるが、その作用機序は明らかになっていない。我々はThemisの核での働きに焦点を当て研究を進めている。内因性の核移行シグナルを改変するによって、細胞質にのみThemisタンパクを発現するマウス（THｃ）、または外来性の核移行シグナルを付加することによって核にのみThemisが存在する変異マウス（THｎ）を作成した。これらのマウスではT細胞の成熟が阻害されていたことよりThemisは細質と核の両方に存在する必要があることが分かった。また、THcマウスとTHnマウスの交配により作成したTHc/nマウスでは核と細胞質にThemisが存在するが互いに他方の分画には移動できない。このマウスでもT細胞の分化は阻害されておりThemisの核と細胞質の相互移動が重要な役割をしていることが分かった。そこで、ThemisタンパクがT細胞受容体刺激を受ける前後でどのようなタンパク質と相互作用しているのかを調べるために外因性のビオチン化酵素であるTurboIDをThemisに結合し、ビオチン化されるタンパク、すなわちThemisに近接したタンパクを細胞質分画と核分画に分け質量分析により網羅的に解析した。その結果、細胞質ではVav1やPtpn22といったシグナル伝達にかかわる分子が、核ではT細胞に特異的な転写制御因子が検出された。これはThemisがTCRシグナルをうけ遺伝子発現を調整している可能性を示唆している。

T細胞特異的に発現しているThemisの遺伝子座はヒトのセリアック病、アトピー性皮膚炎、潰瘍性大腸炎、関節リウマチなどの自己免疫疾患との関連が示唆されている。また、Themis欠損マウスでは成熟T細胞が激減しており、ThemisがT細胞の分化成熟や機能に重要な働きをしていることは明らかであるが、その作用機序は明らかになっていない。我々はThemisの核での働きに焦点を当て研究を進めている。内因性の核移行シグナルを改変するによって、細胞質にのみThemisタンパクを発現するマウス（THｃ）、または外来性の核移行シグナルを付加することによって核にのみThemisが存在する変異マウス（THｎ）を作成した。これらのマウスではT細胞の成熟が阻害されていたことよりThemisは細質と核の両方に存在する必要があることが分かった。また、THcマウスとTHnマウスの交配により作成したTHc/nマウスでは核と細胞質にThemisが存在するが互いに他方の分画には移動できない。このマウスでもT細胞の分化は阻害されておりThemisの核と細胞質の相互移動が重要な役割をしていることが分かった。そこで、ThemisタンパクがT細胞受容体刺激を受ける前後でどのようなタンパク質と相互作用しているのかを調べるために外因性のビオチン化酵素であるTurboIDをThemisに結合し、ビオチン化されるタンパク、すなわちThemisに近接したタンパクを細胞質分画と核分画に分け質量分析により網羅的に解析した。その結果、細胞質ではVav1やPtpn22といったシグナル伝達にかかわる分子が、核ではT細胞に特異的な転写制御因子が検出された。これはThemisがTCRシグナルをうけ遺伝子発現を調整している可能性を示唆している。