Inverted apicobasal polarity of lung micropapillary adenocarcinoma-like organoids and its relationship to metastasis

肺微小乳頭がん（micropapillary carcinoma: MPC）のin vitro 培養モデル構築を目指して研究を行った結果、細胞株Aを低酸素下で細胞外基質Mを用いた三次元培養することにより、反転極性を呈するMPC様構造を誘導することに成功した。以上の研究内容を「MPC様構造体の製造方法」として発明特許出願している。さらに、MPC様構造誘導には転写因子Hが重要であることをCRISPR/Cas9を用いた転写因子Hノックアウト細胞を作製し、証明した。一方で、RhoファミリーGタンパク質であるRhoA、Rac1およびCDC42の活性調節はMPC構造に重要な上皮頂底極性形成に関与することが報告されている。本研究では、RhoAやそのeffector分子であるRho-kinase（ROCK）が上記条件によるMPC様構造誘導に関与することを、各種ROCK阻害薬やRhoAのdominant negative変異体を用いて明らかにした。MPCの悪性化機構として、免疫回避能亢進に着目し研究を行った。その結果、MPC様構造体は2D培養体と比較して、Natural killer（NK）細胞の細胞障害活性に対する感受性が顕著に低下していることを明らかにした。また、上記感受性低下には転写因子Hが重要であることも明らかにした。以上の結果は、MPCの悪性化機構として、NK細胞に対する感受性低下による免疫回避能亢進が関与することおよび上記感受性低下にはMPCの立体構造が重要であることを示唆している。

肺微小乳頭がん（micropapillary carcinoma: MPC）のin vitro 培養モデル構築を目指して研究を行った結果、細胞株Aを低酸素下で細胞外基質Mを用いた三次元培養することにより、反転極性を呈するMPC様構造を誘導することに成功した。以上の研究内容を「MPC様構造体の製造方法」として発明特許出願している。さらに、MPC様構造誘導には転写因子Hが重要であることをCRISPR/Cas9を用いた転写因子Hノックアウト細胞を作製し、証明した。一方で、RhoファミリーGタンパク質であるRhoA、Rac1およびCDC42の活性調節はMPC構造に重要な上皮頂底極性形成に関与することが報告されている。本研究では、RhoAやそのeffector分子であるRho-kinase（ROCK）が上記条件によるMPC様構造誘導に関与することを、各種ROCK阻害薬やRhoAのdominant negative変異体を用いて明らかにした。MPCの悪性化機構として、免疫回避能亢進に着目し研究を行った。その結果、MPC様構造体は2D培養体と比較して、Natural killer（NK）細胞の細胞障害活性に対する感受性が顕著に低下していることを明らかにした。また、上記感受性低下には転写因子Hが重要であることも明らかにした。以上の結果は、MPCの悪性化機構として、NK細胞に対する感受性低下による免疫回避能亢進が関与することおよび上記感受性低下にはMPCの立体構造が重要であることを示唆している。