BRCA1複合体の中心体制御機構の解析による組織特異的発がん機序の解明

通过分析BRCA1复合物的中心体控制机制阐明组织特异性致癌机制

• 批准号: 21K07143
• 负责人: 吉野 優樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07143/
• 关键词: 中心体; 中心小体; BRCA1; RACK1; 乳がん; 翻訳後修飾; 局在制御

BRCA1複合体による中心体複製制御機構を明らかにするため、本年度はBRCA1複合体構成因子が中心小体複製のどのステップに必要なのかを解析した。BRCA1複合体構成因子であり、中心体複製に必要であることが明らかになっているRACK1をRNAiでノックダウンし、中心小体複製の各段階が進行しうるかを調べた。中心小体複製のマーカーとして、娘中心小体複製の足場として最初期に母中心小体に集族するCEP192およびCEP152、CEP152依存性に活性化したPLK4によってリン酸化され、娘中心小体原基を形成するSTILおよびNEDD1を用いて解析を行った。その結果、RACK1をノックダウンするとSTIL、NEDD1の集族が抑制された。このことから、RACK1が娘中心小体原基の形成ステップで必要であることが示唆された。また、RACK1は複数の残基でリン酸化を受けることが知られている。中心体においてリン酸化されていることが示唆されているセリン残基を変異させ、内在性RACK1をノックダウンした細胞に発現させたところ、STILの集族障害をレスキューできなかった。さらに、同セリン残基のリン酸化ペプチドに対する特異抗体を作成し、免疫染色によってリン酸化RACK1の局在を観察したところ、リン酸化RACK1が中心体に局在し、その局在量は細胞周期によって変動することが明らかになった。これらから、RACK1が中心体制御キナーゼによってリン酸化されることが、娘中心小体原基形成に必要であることが示唆された。さらに、種々の細胞株を用いて解析したところ、RACK1をノックダウンすると乳がん細胞株ではSTILの集族が抑制されるが、乳がん以外の細胞株では抑制されず、娘中心小体原基形成のRACK1依存性は組織特異的であることが示唆された。

BRCA1 complexes に よ る centrosome replication system of the royal institution を Ming ら か に す る た め, this year's は BRCA1 complexes form factor が center corpuscle copy の ど の ス テ ッ プ に necessary な の か を parsing し た. BRCA1 complexes form factor で あ り, centrosome replication に necessary で あ る こ と が Ming ら か に な っ て い る RACK1 を RNAi で ノ ッ ク ダ ウ ン し, copy の of center body paragraphs order が し う る か を adjustable べ た. Central body copy の マ ー カ ー と し て, niang center small body copy の foot field と し て most early に mother center corpuscle に set す る CEP192 お よ び CEP152, CEP152 dependability に activeness し た PLK4 に よ っ て リ ン acidification さ れ, niang center corpuscle primordium を form す る STIL お よ び NEDD1 を with い て parsing を line Youdaoplaceholder0. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, RACK1をノッ ダウ ダウ するとSTIL, NEDD1 <s:1> population が inhibition された. The formation of the ステップで necessary である とが とが とが ら ら, RACK1が female central small body primitive <s:1> ステップで necessary である とが とが inciting された. Youdaoplaceholder0, RACK1 また complex <s:1> residues でリ <s:1> acidification を is known by ける られて とが とが られて る る. Centrosome に お い て リ ン acidification さ れ て い る こ と が in stopping さ れ て い る セ リ ン residues を - different さ せ, internality RACK1 を ノ ッ ク ダ ウ ン し た cells に 発 now さ せ た と こ ろ, STIL の set handicap of を レ ス キ ュ ー で き な か っ た. さ ら に, with セ リ ン residues の リ ン acidification ペ プ チ ド に す seaborne る を し consummate specific antibody, immune dyeing に よ っ て リ ン acidification RACK1 の bureau in を 観 examine し た と こ ろ, リ ン acidification RACK1 が centrosome に bureau in し, そ の bureau in quantity は cell cycle に よ っ て - move す る こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ ら か ら, RACK1 が center system royal キ ナ ー ゼ に よ っ て リ ン acidification さ れ る こ と が, niang center corpuscle primordium formation に necessary で あ る こ と が in stopping さ れ た. さ ら に, kind of 々 の cell lines を with い て parsing し た と こ ろ, RACK1 を ノ ッ ク ダ ウ ン す る と milk が ん cell lines で は STIL の set が inhibit さ れ る が, milk が ん outside の cell lines で は inhibit さ れ ず, niang center corpuscle primordium formation の RACK1 dependency は tissue specific で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

BRCA1はATMによるリン酸化を介してDNA損傷シグナルを中心体に輸送する

BRCA1 通过 ATM 磷酸化将 DNA 损伤信号转运至中心体

• 发表时间: 2021
• 作者: 千葉 奈津子;菊池 めぐみ;方 震宙;後藤 孝太;吉野 優樹;石岡 千加史;斉 匯成
• 通讯作者: 斉 匯成

BRCA1はAurora AによるOLA1のユビキチン化に作用して中心体成熟を促進する

BRCA1 通过 Aurora A 泛素化 OLA1 促进中心体成熟

• 发表时间: 2022
• 作者: 李 星明;方 震宙;吉野 優樹;石岡 千加史;森 隆弘;千葉 奈津子
• 通讯作者: 千葉 奈津子

NEK2はAurora AによるOLA1のユビキチン化を促進して中心体数を制御する

NEK2 促进 Aurora A 对 OLA1 的泛素化并控制中心体数量

• 发表时间: 2022
• 作者: 方 震宙;李 星明;吉野 優樹;石岡 千加史;森 隆弘;千葉 奈津子
• 通讯作者: 千葉 奈津子

Aurora AによるOLA1のユビキチン化はPCMを制御して中心体数をコントロールする

Aurora A 泛素化 OLA1 调节 PCM 和中心体数量

• 发表时间: 2021
• 作者: 方 震宙;李 星明;鈴木 萌;吉野 優樹;斉 匯成;森 隆弘;千葉 奈津子
• 通讯作者: 千葉 奈津子

BRCA1とその関連分子の変化による中心体制御異常とゲノム不安定性

BRCA1 和相关分子的变化导致中心体失调和基因组不稳定

• 发表时间: 2022
• 作者: 千葉 奈津子;吉野 優樹;方 震宙
• 通讯作者: 方 震宙