卵巣がんにおけるリン酸エクスポーターXPR1の機能解析

磷酸盐输出蛋白 XPR1 在卵巢癌中的功能分析

• 批准号: 21K07146
• 负责人: 林 寛敦
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07146/
• 关键词: XPR1; Phosphate transporter; 卵巣癌; 卵巣明細胞癌; Apoptosis

卵巣明細胞がんは多様性に富み治療抵抗性が高いため予後不良である。そのため、新たな治療方法の開発が求められている。私たちは卵巣明細胞がん細胞株に対するCas9スクリーニングにより、リンの細胞外への排出を制御する8回膜貫通タンパク質XPR1が、がん細胞の増殖に必須であることを見出した。これまでに、卵巣明細胞がん細胞においてsiRNAによりXPR1の発現を抑制すると細胞死が誘導され顕著に増殖が抑制されること、さらに、XPR1の発現をshRNAによって恒常的に抑制したがん細胞を免疫不全マウスに移植すると、造腫瘍能の低下が認められることを明らかにしており、これらのことから、XPR1は卵巣がんに対する新たな治療標的分子として非常に有望であると期待される。しかし、その細胞死誘導の分子機構については未だ明らかになっていない。そこで本年度は、XPR1の発現を抑制した卵巣明細胞がん細胞のRNA-seq解析を行い、XPR1の下流のシグナル伝達経路を検討した。その結果、NFkBシグナルやRAS経路が活性化していることが示唆され、NFkBやRASの下流のErk1/2のリン酸化状態を確認したところ、卵巣明細胞がん細胞においてXPR1の発現を抑制するとNFkB（S276、S536）およびErk1/2のリン酸化が亢進することが明らかになった。また、NFkBシグナルの標的遺伝子の発現変動をqPCRによって確認したところ、ATF3やTNFIP3などがんの増殖を抑制することが報告されている遺伝子を含む多くのNFkBシグナルの標的遺伝子の有意な上昇が認められた。以上のことから、XPR1の発現抑制による卵巣明細胞がん細胞の細胞死誘導には、NfkBシグナルの亢進が重要である可能性が示唆された。

The egg is clear that the cells are rich, the disease is rich, the resistance is high, and the future is bad. The new methods of treatment and treatment should be used to treat the disease. It is clear that there is no need for cell colonization in the Cas9 cell line, the cell line, the cell, the cell. The results showed that there was no significant difference between the control group and the control group. There was no significant difference between the control group and the control group. There was no significant difference between the control group and the control group. There was no significant difference between the control group and the control group. There was no significant difference between the control group and the control group. The results showed that the cell death rate was significantly higher than that of the control group (P < 0. 05). The results show that there is a constant immune deficiency in siRNA cells, which is not known to be transplantable. The molecular weight of the new drug is expected to be very high in XPR1. The death of the dead cells of the leading molecular organs has not yet been clearly explained. In the current year, XPR1 has shown that it is necessary to suppress the number of eggs, the number of cells, the analysis of cell RNA-seq, and the analysis of XPR1. The results showed that NFkB (S276, S536), Erk1/2 (S276, S536), anti-NFkB (S276, S536), Erk1/2 (S276, S536). The sub-system of the NFkB information system and the sub-system of the TNFIP3 information system show that it is intended to register the computers that are loaded with multiple NFkB messages, such as the confirmation of the information, the suppression of the colonization and the suppression of the production of the products. The results of the above tests and XPR1 tests show that the inhibition of eggs, the induction of cell death and the activation of NfkB cells indicate the possibility of instigation.

项目成果

1細胞発現解析による卵巣がんの多様性の理解

通过单细胞表达分析了解卵巢癌的多样性

• 发表时间: 2022
• 作者: 林 寛敦;川畑 絢子;藤木 克則;中戸 隆一郎;白髭 克彦;岡本 愛光;秋山 徹
• 通讯作者: 秋山 徹

Identification and analysis of genes required for the growth of ovarian cancer cells by CRISPR/Cas9 screening

通过CRISPR/Cas9筛选鉴定和分析卵巢癌细胞生长所需的基因

• 发表时间: 2022
• 作者: Tomoatsu Hayashi;Yoko Akasu-Nagayoshi;Ayako Kawabata;Aikou Okamoto and Tetsu Akiyama.
• 通讯作者: Aikou Okamoto and Tetsu Akiyama.