DDSが賦与するCpG核酸能を利用した肝細胞癌の治療

利用DDS赋予的CpG核酸能力治疗肝细胞癌

基本信息

批准号：
21K07175
负责人：
辻村直人
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07175/
关键词：
CpG 肝細胞癌 DDS

项目摘要

肝細胞癌は癌関連死亡率が高く最新治療の創出が求められている。私達がこれまで開発してきた生体作動性のDDSであるスーパーアパタイトナノ粒子(sCA)にCpG核酸を内包化すると、腫瘍にピンポイントにCpGを送達できるため安全性が大幅に向上する。更に通常臨床で使用されるCpG核酸は、B細胞を活性化しIL6を産生して樹状細胞からのIFNαの分泌を誘導しないが、CpGをsCAに内包するとIFNα誘導能が増強されることが分かってきた。本研究ではスーパーアパタイトによって新たに賦与されたCpG核酸の優れた抗腫瘍効果を利用して、肝細胞癌に対する効果的な治療戦略を確立する。2022年度はこのメカニズムを調べるために、in vitroでCpGをsCAに内包させ各種のサイトカイン産生を網羅的に調べようとした。通常sCAはvivo用に作成するのであるが、これをそのままvitroに使うと毒性が出て評価が困難となったため、in vitro用として最適化が必要となった。先に粒子を作ってこれをバッファーに溶解させる方法や、バッファーの中で粒子を合成する方法、更に原材料の比率やpHを変えて毒性を減らす工夫などの実験を繰り返し、CpG 30nM 以下の濃度であれば安定して実験ができる条件を見出した。他方、これまでsCA-CpGの新たな生理活性としてのIFNα産生に着目し肝細胞癌を中心に検討を進めてきたが、実用化という観点から、他の癌での抗腫瘍効果の程度を知ることは重要である。In vitro解析と並行してvivoで大腸癌HCT116と脳腫瘍（膠芽腫）T5-19をヌードマウスに植え、sCA-CpGによる治療実験を行った。その結果、大腸腫瘍には極めてよく効いたが、脳腫瘍への効果はみられなかったことから、CpGの抗腫瘍効果には腫瘍特異性があると考えられた。

肝细胞癌的死亡率很高，需要创建最新疗法。将CpG核酸封装到超磷灰石纳米颗粒（SCA）中，这是我们到目前为止已经开发的生物能DDS，可以大大提高安全性，因为CPG可以以精确的方式将CPG递送到肿瘤。此外，通常在临床实践中使用的CpG核酸激活B细胞并产生IL6，并且不会诱导树突状细胞的IFNα分泌，但是已经发现将CPG封装在SCA中增强了诱导IFNα的能力。这项研究利用了Superapatite新授予的CpG核酸的出色抗肿瘤作用来为肝细胞癌建立有效的治疗策略。在2022年，为了研究这种机制，在体外将CpG纳入了SCA，以全面研究各种细胞因子的产生。通常，SCA是用于体内的，但是如果直接在体外使用，它会变得有毒且难以评估，因此有必要优化体外。我们已经重复进行了实验，例如首先创建颗粒并将其溶解在缓冲液中，将颗粒合成缓冲液中，并改变原材料的比率和pH，以降低毒性，并发现以CPG浓度以低于30nm的浓度进行稳定实验的条件。另一方面，我们专注于IFNα的产生是SCA-CPG的新生理活性，重点是肝细胞癌，但是从实际使用的角度来看，重要的是要了解其他癌症对抗肿瘤作用的程度。与体外分析同时，将结肠癌HCT116和脑肿瘤（胶质母细胞瘤）T5-19种植在体内的裸鼠中，并使用SCA-CPG进行了治疗实验。结果，尽管对结肠肿瘤非常有效，但未观察到对脑肿瘤的影响，但人们认为CpG的抗肿瘤作用是肿瘤特异性的。