Exploring mechanism underlying resistance to kras inhibitor

探索 kras 抑制剂耐药机制

• 批准号: 21K07204
• 负责人: 米阪 仁雄
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kindai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07204/
• 关键词: KRAS; ソトラシブ; EGFR; PTPRR; MET; MEK; AKT

KRAS阻害剤ソトラシブ（AMG510）の耐性機序の解明、さらに耐性克服治療の開発につなげることを目的に本研究を継続している。第一にKRAS変異陽性肺癌細胞株H23を用いたソトラシブ耐性株の樹立、及び耐性機序の解明、耐性克服治療の研究を進めた。結果、cMET遺伝子増幅が耐性の原因であることを同定した。そしてｃＭＥＴ阻害剤クリゾチニブとの併用によりソトラシブ耐性が克服できることを前臨床試験で確認できた。第二にKRAS変異陽性肺癌細胞株H2122を用いてソトラシブ耐性株を樹立。次世代シークエンサーによる遺伝子解析ではcMETを含めた二次的遺伝子変異を認めず。一方で同耐性株では親株と比べEGFRのリン酸化が亢進していた。このため耐性株を用いたin vitro薬剤感受性試験を行ったところ、EGFR阻害剤セツキシマブとソトラシブの相乗効果を認めた。さらにin vivoでの感受性試験においても両剤の併用はそれぞれの単剤投与と比べ、有意に腫瘍縮小効果を示した。次にマイクロアレイによる発現解析を行ったところ、親株と比べ耐性株では脱リン酸化酵素であるPTPRR遺伝子の顕著な発現低下を認めた。免疫沈降実験ではPTPRR蛋白はEGFRと結合し、EGFRの脱リン酸化をもたらすことが確認できた。従ってソトラシブ耐性細胞株ではPTPRR遺伝子発現低下がEGFRの２次的な活性化をもたらし、ソトラシブ耐性の原因となっていると考えた。続いてPTPRR遺伝子のメチル化解析を行った。耐性細胞株のPTPRR遺伝子の一部のプロモーター領域では（親株と比べ）脱リン酸化がみられた。現在、脱リン酸化された同プロモーター領域に遺伝子発現抑制因子の結合が亢進していることを確認中である。また臨床での腫瘍サンプルを用いてPTPRR遺伝子の脱リン酸化について評価を行っている。

To clarify the mechanism of resistance to KRAS inhibitor AMG510 and to develop a new method for resistance therapy, this study was conducted in the laboratory. The first is the establishment of KRAS hetero-positive lung cancer cell line H23, the elucidation of its tolerance mechanism and the study of its resistance overcoming therapy. The results show that the cMET gene has increased its tolerance. CMET resistance is confirmed by clinical trials before it is overcome by the combination of CMET resistance and CMET resistance. The second KRAS hetero-positive lung cancer cell line H2122 was established by using the medium to develop a resistant line. The next generation of genetic analysis, including the second generation of genetic diversity, The resistant plants of the same species are more resistant to EGFR than their parents. The resistance of the plant to EGFR is determined by the sensitivity test. In vivo, the sensitivity test is performed in combination with the test results obtained by the test. The expression of PTPRR gene is lower than that of resistant strain. PTPRR protein binding to EGFR and EGFR deacidification are recognized by immunoprecipitation. A study on the causes of EGFR secondary activation in PTPRR resistant cell lines The analysis of PTPRR gene and its structure A part of PTPRR gene of resistant cell line was isolated from the field. Now, deacidification is the same as in the field of gene expression inhibition factor binding is enhanced in the field of gene expression inhibition factor identification. The clinical application of PTPRR gene in the treatment of cancer

项目成果

MET遺伝子増幅によるソトラシブへの耐性

由于 MET 基因扩增而对 sotorasib 产生耐药性

• 发表时间: 2021
• 作者: Shinichiro Suzuki;Kimio Yonesaka;Junko Tanizaki;Hisato Kawakami;Hidetoshi Hayashi;Kazuko Sakai;Kazuto Nishio;Kazuhiko Nakagawa;鈴木慎一郎 米阪仁雄
• 通讯作者: 鈴木慎一郎 米阪仁雄

MET遺伝子増幅に依存した KRAS G12C遺伝子変異を有する非小細胞肺癌のRASあるいは非RASシグナルを介したKRAS阻害剤への耐性

KRAS G12C 基因突变非小细胞肺癌中 RAS 或非 RAS 信号介导的 KRAS 抑制剂耐药性依赖于 MET 基因扩增

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木 慎一郎;米阪 仁雄;坂井 和子;西尾 和人;中川 和彦
• 通讯作者: 中川 和彦

癌治療用組成物

用于癌症治疗的组合物

• 发表时间: 2022