「造骨性」骨転移の診断治療法の開発に向けたWntシグナルパスウェイの役割の解明

阐明 Wnt 信号通路在“成骨细胞”骨转移诊断治疗开发中的作用

• 批准号: 21K07230
• 负责人: 須堯 綾
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Institutes for Quantum Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07230/
• 关键词: 骨転移; Wntシグナルパスウェイ; 造骨; 造骨性骨転移

溶骨型骨転移モデルはすでに確立されており、発生メカニズムの解明と治療法の開発が進んでいるが、造骨型骨転移のモデルはなく、その発生メカニズムも不明である。Wntシグナルパスウェイは、癌の発生などに関与し、骨形成や骨吸収への関与が報告されているが、骨転移への関与のエビデンスは存在しない。我々は造骨型の分子メカニズムを解明し、Wntシグナルパスウェイの促進または阻害による骨転移発生パターンを高精細CTイメージングで解析し、造骨型骨転移モデルの樹立と、画像診断法・治療法の開発を目指す。前年度までにWntファミリーメンバーのなかで、骨代謝に関連する可能性が高いWnt1、Wnt3a及びWnt5aの過剰発現ベクターを構築した。この発現ベクターを、我々が樹立した乳がん由来の溶骨型骨転移モデル5a-D-Luc-ZsGreen細胞に導入し、安定発現株を各8クローンずつ作成した。リアルタイムRT-PCRで発現レベルを確認し、Wnt高発現株を選択した。今年度は樹立したWnt1、Wnt3a及びWnt5aの高発現株とコントロールとして5a-D-Luc-ZsGreen細胞をメスのヌードマウスの左心室に心腔内移植し、骨転移動物モデルを作成した。IVISを用いたルシフェラーゼによる発光イメージングで、骨転移の経過を確認した。骨転移が見られた個体を小動物用マイクロCTで造骨性骨転移の有無を確認し、Wnt1高発現細胞を移植した個体に造骨が確認された。骨転移が確認された大腿骨と脛骨はサンプリングしHE染色を行った。

Osteolytic bone migrating bone migrating bone migrating bone migrating bone migrating bone migrating bone is established and treatedが入んでいるが, osseoplastic bone transfer のモデルはなく, その発生メカニズムもUnknown である. Wnt シグナルパスウェイは, cancer の発生などに关与し, bone formation やbone resorption へThe report of the pass and the report of the pass, the pass of the pass and the existence of the pass. I am a bone-building type molecule メカニズムを解明し、Wnt シグナルパスウェイのpromote または hinder によるbone transfer 発生パターンをHigh-definition CT scan and analysis, osteosynthetic bone transfer and establishment, imaging diagnosis and treatment methods, and eye fingering. Possibility of the previous year's disease and bone metabolism related to bone metabolismが高いWnt1, びWnt3a and びWnt5a are constructed by ベクターを.この発成ベクターを、我々がEstablishmentした Breastがんoriginのbone-dissolving type bone transfer モデル 5a-D- Luc-ZsGreen cells were introduced and stable strains were produced using 8 クローンずつ.リアルタイムRT-PCR で発成レベルをconfirmationし, Wnt 高発市を选択した. This year, the current high-quality strains of Wnt1, Wnt3a and Wnt5a have been established: とコントロールとして5a-D-Lu The c-ZsGreen cells were transplanted into the left ventricle of the heart using a cell transplant, and the bone marrow was transplanted into the heart. IVISを用いたルシフェラーゼによる発光イメージングで、bone転提の経passをconfirmationした. The presence or absence of osteogenic bone transplantation can be confirmed using MicroCT in small animals, and Wnt1 high-risk cell transplantation can be used to confirm osteogenesis in individual small animals. Bone migration was confirmed by HE staining of the femur and tibia.