Understanding mechanism of next generation stem cell mobilization method through the conventional method.

通过传统方法了解下一代干细胞动员方法的机制。

• 批准号: 21K07386
• 负责人: 横濱 章彦
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07386/
• 关键词: 末梢血幹細胞動員; G-CSF; CXCR2; CXCR2リガンド; MMP9; CD34; 幹細胞動員; 末梢血幹細胞移植; CXCR2 ligand

昨年度までの末梢血幹細胞動員を行うドナーにおけるMMP9の発現解析はヒト検体を用いた研究であったが、研究課題であるCXCR2リガンドの発現とCXCR2-MMP9のシグナル伝達によるMMP9発現の関連をリアルタイムで解析するため、2022年度はマウスを用いて末梢血幹細胞動員のモデルを作成した。G-CSF投与後にCXCR2リガンドの経時間的な発現変化について解析した。G-CSF投与により、末梢血のLineage(-)/c-kit(+)/Sca1(+)(LSK)細胞は徐々に増加し、5日目には48.5個/5000個ビーズとなりヒトと同様に経時間的な末梢血幹細胞動員が認められた。マウスCXCR2リガンドは、CXCL1, 2, 3, 5, 7, 15の６つが知られておりrealtime PCR法で解析した。その結果、G-CSF投与5日目に投与前と比べて有意と思われる2倍以上の発現の変化を認めたのは、CXCR1, 2, 3, 15の4つであり、CXCL5, 7にはほとんど変化は見られず、G-CSG投与による末梢血幹細胞動員においてはその役割は否定的だった。最も発現の変化が認められたのはCXCL15であり、投与前に約37倍に増加した。今までの末梢血幹細胞動員に重要とされていたCXCL2は8.1倍、CXCL1は3.6倍の増加であった。CXCL2, 3はG-CSF投与1日目で4.5倍ほどに発現増加の後、3日目には2倍程度まで減じ、その後増加に転じた。CXCL15は日毎に発現量が増した。

The analysis of MMP-9 expression in peripheral blood stem cell mobilization in 2020 and the study of MMP-9 expression in peripheral blood stem cell mobilization in 2022 were carried out. CXCR2 release time analysis after G-CSF injection The number of peripheral blood stem cells mobilized by G-CSF administration increased to 48.5/5000 on the 5th day after administration, and the number of peripheral blood stem cells mobilized increased to 48.5/5000 on the 5th day. CXCR2, CXCL1, 2, 3, 5, 7, 15 and 6 were analyzed by realtime PCR. The results, G-CSF injection and 5 days before the injection and the intention to think more than 2 times the occurrence of the change, CXCR1, 2, 3, 15 of 4, CXCL5, 7 of the change, G-CSG injection and peripheral blood stem cell mobilization of the change, negative. CXCL15 is about 37 times higher than before. CXCL2 and CXCL1 increased by 8.1 and 3.6 fold respectively. CXCL2, 3 showed an increase of 4.5 times after administration of G-CSF on the first day, a decrease of 2 times on the third day, and an increase on the third day. CXCL15 has increased daily occurrence.