Development of clinical test using new amino acid coloring method

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本研究は，アミノ酸の新規発色法を開発し，生体試料中のアミノ酸を測定する臨床検査法への応用を目的とする．2022年度の主な研究成果を以下に示す．（１）アミノ酸の一つであるトリプトファンの新規発色法を考案した．希塩酸や次亜塩素酸ナトリウム五水和物等を用い，トリプトファン水溶液を赤褐色に発色させる方法を開発した．さらに，赤褐色に発色したトリプトファン水溶液は，520 nm付近にピークをもつ吸収曲線を示すことを明らかにした．（２）アミノ酸からアミノ基が脱離するとアンモニアが生成される．このように，アミノ酸とアンモニアは関連性があることから，アンモニアの検出法に関しても検討をおこなった．その結果，次亜塩素酸ナトリウム五水和物等を用い，アンモニア水を青色に発色させる方法を考案した．また，青色に変化したアンモニア水は，626 nmにピークをもつ吸収曲線を示した．さらに，この青色の色素をメタノールで抽出した試料を用い，LC-TOF-MSによる解析を行った結果，m/z 292に大きいイオンピークを示すマススペクトルが得られた．（３）アンモニア（NH3）は生物ろ過によって亜硝酸（HNO2）に分解されるなど，アンモニアは亜硝酸の生成源となる．そこで，亜硝酸に対する次亜塩素酸ナトリウム五水和物の影響を，分光法，定量試薬，そして試験紙を用いて解析した結果，次亜塩素酸ナトリウム五水和物の添加により，亜硝酸イオン（NO2-）は硝酸イオン（NO3-）に酸化されることを明らかにした．