Testing the "serotonin hypothesis of depression" by in vivo genome editing

通过体内基因组编辑测试“抑郁症的血清素假说”

• 批准号: 21K07473
• 负责人: 大村 優
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07473/
• 关键词: セロトニン; うつ病; 気分障害; 背側縫線核; 5-HT

令和４年度には、HPLC-ECD(電気化学検出高速液体クロマトグラフィー)によるセロトニン量減少の確認を実施することが計画されていた。所有装置が経年劣化していたため、いくつかの部品を交換し、基礎検討をやり直した。また、マウスの脳からわずか１mm程度の背側縫線核を回収しなくてはならないが、毎回安定して同じ部位を切り出すことが難しく、5-HTの値がコントロール群ですら安定しない。そこで、脳スライスをビブラトームを用いて切り出して顕微鏡下で背側縫線核を切り出す方法を採用し、比較的安定したデータを取ることに成功した。そして、セロトニン合成酵素TPH2の遺伝子を切断するように設計されたウイルスベクターの脳内投与によって、背側縫線核のセロトニン含有量が低下していることを確認できた。同時に、グルタミン酸の含有量は低下していないことも確認でき、この方法によりセロトニン合成のみが阻害されていることを示した。もう一つの計画は、仮説「脳内セロトニンが減るとうつ病になる」の検証であった。結果として、背側縫線核にウイルスベクターを投与したTPH2ノックアウト群において、強制水泳試験における無動時間が増加していることを見出した。つまり、セロトニン合成の低下によってマウスは諦めやすくなり、行動学的絶望状態に陥りやすくなることが示された。さらに、スクロース嗜好性試験においても嗜好性の低下が観察され、背側縫線核のセロトニン合成の低下によって無快感症が誘発されていることが示された。

In 2010 and 2014, HPLC-ECD (Electrochemical Detection of High Speed Liquid) was used to confirm the reduction in the amount of hydrogen. All devices are aged and degraded, components are exchanged, and the basis is discussed. The back seam core of about 1 mm in length is cut back, and the stable part of each loop is cut back. The 5-HT value is stable. The method of cutting out the back seam under the microscope is adopted and compared successfully. It was confirmed that the content of TPH2 gene in the dorsal suture core was lower than that in the dorsal suture core. At the same time, it was confirmed that the content of glitamin acid was low, and this method hindered the synthesis of gelatin. The first step is to make a plan to reduce the risk of disease. The results showed that the time of inactivity increased in the TPH 2 group and in the stress group. The low level of synthesis and the desperate state of action are shown in the following ways: In addition to the above, the study also shows that there is a tendency to reduce the level of addiction, and that there is a tendency to reduce the level of addiction, and that there is a tendency to reduce the level of addiction.