気分安定薬標的候補分子としてのミトコンドリア蛋白C1qbpの生理的役割

线粒体蛋白 C1qbp 作为情绪稳定剂候选靶点的生理作用

• 批准号: 21K07528
• 负责人: 窪田 美恵
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07528/
• 关键词: C1qbp; 気分障害; ミトコンドリア; ミトコンドリア透過性遷移; シナプス

昨年度、ノックアウトマウスにおいてもC1qbp抗体シグナルが出てしまい、抗体の妥当性が疑われたため、今年度はマウスC1qbpを抗原とした、ミトコンドリア移行配列のない抗体を用いて検討した。しかし、同様にC1qbpシグナルが検出されてしまい、抗体がワークしていない可能性が考えられた。最新の報告では、C1qbpはミトコンドリア移行配列によりミトコンドリア内へ局在するが、細胞内シグナルによりCaspase 3が活性化すると、一部が切断されて、ミトコンドリアから細胞質や細胞膜、ERなどへ移動することが示された。そのため、全長を認識する抗体では、切除された部分的C1qbpタンパク質を認識してしまうと報告されていた。ノックアウトマウスではExon3にStopコドンが入り、それ以降が合成されないはずであるが、それ以前の配列は合成されている可能性があり、それらを認識していると考えられた。一方、C1qbpタンパク質はシナプスに多く存在するという報告がされており、ノックアウトマウスでのシナプスミトコンドリアの形態観察の報告例は少ないため、電顕標本を用いて、C1qbpの免疫組織化学染色で多く存在が知られている脳部位（海馬CA2、手綱核、視床下部室傍核など）のミトコンドリア形態を観察した。ノックアウトマウスのシナプス内ミトコンドリア形態は、一部、膜構造が崩れていたり、クリステやシナプスの形状に異常が見られたりした。特に手綱核内に形成されているシナプスにおいてはポストシナプスの肥大化が見られた。ニッスル染色では、光顕レベルでのマクロな脳の形態異常として、白質内空砲を認めた。しかし、極端な細胞脱落は見られず、GFAPでの抗体染色も行ったが、グリア細胞の浸潤なども見られなかった。C1qbpノックアウトにより、シナプス内ミトコンドリア異常、およびシナプス形態の異常が生じたと考えられた。

Last year, ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に お い て も C1qbp antibodies シ グ ナ ル が out て し ま い, antibody の justice が suspected わ れ た た め, our は マ ウ ス C1qbp を antigen と し た, ミ ト コ ン ド リ ア transitional arrangement の な を use い い antibody て beg し 検 た. し か し, with others in に C1qbp シ グ ナ ル が 検 out さ れ て し ま い, antibody が ワ ー ク し て い な い possibility が exam え ら れ た. Latest report の で は, C1qbp は ミ ト コ ン ド リ ア transitional arrangement に よ り ミ ト コ ン ド リ ア へ inside bureau in す る が, intracellular シ グ ナ ル に よ り Caspase 3 が activeness す る と, a が cut-off さ れ て, ミ ト コ ン ド リ ア か ら や cytoplasm membrane, ER な ど へ mobile す る こ と が shown さ れ た. そ の た め, span を す る antibody で は, excision さ れ た part of C1qbp タ ン パ ク qualitative を know し て し ま う と report さ れ て い た. ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で は Exon3 に Stop コ ド ン が into り, そ れ in が synthetic さ れ な い は ず で あ る が, そ れ の before match column は synthetic さ れ て い る possibility が あ り, そ れ ら を know し て い る と exam え ら れ た. Side, C1qbp タ ン パ ク qualitative は シ ナ プ ス に す more く る と い う report が さ れ て お り, ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で の シ ナ プ ス ミ ト コ ン ド リ ア の form 観 examine の report cases of less は な い た め, electric 顕 specimens を い て, C1qbp の immunohistochemical staining で が know more く ら れ て い る 脳 parts (CA2 hippocampus, The parietal nucleus of the suborbital nucleus of the palmoplana な, な トコ, ドリア, ドリア morphology を観, examination た, た. ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の シ ナ プ ス within ミ ト コ ン ド リ は ア form, film, membrane structure が collapse れ て い た り, ク リ ス テ や シ ナ プ ス の abnormal shape に が see ら れ た り し た. The に in the nucleus of the に hand class forms されて るシナプスにお て て ポストシナプス ポストシナプス ポストシナプス が see られた. ニ ッ ス ル dyeing で は, light 顕 レ ベ ル で の マ ク ロ な 脳 の abnormal-looking と し て, white matter in air ball を recognize め た. See し か し, extreme な cell falls off は ら れ ず, GFAP で の antibody staining line も っ た が, グ リ の ア cell infiltrate な ど も see ら れ な か っ た. C1qbp ノ ッ ク ア ウ ト に よ り, シ ナ プ ス within ミ ト コ ン ド リ ア abnormalities, お よ び シ ナ プ ス form abnormal の が raw じ た と exam え ら れ た.