心筋細胞と心筋線維芽細胞の相互作用に着目した小児拡張型心筋症の病態解明

阐明小儿扩张型心肌病的病理学，重点关注心肌细胞和心肌成纤维细胞之间的相互作用

• 批准号: 21K07749
• 负责人: 石井 良
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07749/
• 关键词: 拡張型心筋症; 心筋線維芽細胞; 心筋細胞; RNA-seq; iPS細胞

小児拡張型心筋症の患者において、補助人工心臓装着時あるいは心臓移植時に心筋組織を採取し、そこから心筋線維芽細胞の培養を行った。この心筋線維芽細胞の初代培養細胞と、健常人由来心筋線維芽細胞を使用して実験を行った。まず、細胞の基本的機能である細胞増殖能・遊走能・接着能については、拡張型心筋症の心筋線維芽細胞は健常と比較して有意な変化は認めなかった。さらに、細胞アポトーシスやミトコンドリア機能についても差を認めなかった。次に、健常な心筋細胞と共培養を行うと、拡張型心筋症心筋線維芽細胞と共培養した心筋細胞では、収縮能および拡張能が増悪することが明らかとなった。拡張型心筋症心筋線維芽細胞では、遺伝子発現パターンが健常の心筋線維芽細胞とは大きく異なっており、様々な液性因子や接着因子の発現変化によって、心筋線維芽細胞が主体的に心筋細胞の機能を障害することが明らかとなった。パスウェイ解析により、細胞外マトリクスの発現変化と接着因子のシグナル経路の異常、さらにHippo pathwayやTGFβの経路が拡張型心筋症の心筋線維芽細胞では有意に変化していることが明らかとなった。この拡張型心筋症心筋線維芽細胞の集団の中に、特に発現パターンの異なっているsub-populationが存在するのかどうかを明らかにするために、single cell RNA-seq解析を行ったが、明らかに病態形成に関わるような発現パターンを示すsub-populationは同定できなかった。現在、論文を投稿し、査読者の要望に応じて追加実験を施行している。

In patients with small heart disease, the artificial heart was installed, and the heart tissue was collected and cultured during heart transplantation. The primary culture cells and healthy human derived cells of cardiac muscle line were used in this study. The basic functions of cells include cell proliferation, migration, and subsequent ability to control and control the development of cardiac muscle cells in tension type heart disease. In addition, the cell is divided into three parts: The co-culture of cardiac muscle cells with secondary, normal, and extensional cardiac muscle diseases was conducted in a manner that increased the contractile and extensional energy of cardiac muscle cells. The development of cytokinin and cytokinin in cardiac muscle cells with tension-type heart disease has been shown to impair the function of cardiac muscle cells in the main body of cardiac muscle cells. In addition, the expression of extracellular factors and the abnormal pathway of adhesion factors are also detected in the hippocampus and TGFβ pathway. The sub-population exists in the population of tension-type cardiac muscle cells, especially in the sub-population. The sub-population is analyzed by single cell RNA-seq analysis. Now, the paper is submitted, the researcher's expectations are added, and the implementation is completed.