活性化肝星細胞におけるSOCS3のエピジェネティック抑制とSTAT3の活性化亢進

活化的肝星状细胞中 SOCS3 的表观遗传抑制和 STAT3 的激活增强

• 批准号: 21K07944
• 负责人: 中尾 一彦
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07944/
• 关键词: 肝星細胞; TGF-β; SOCS3; STAT3; DNA methyltransferase

ヒト肝星細胞株であるLX2細胞並びにHHSteCs細胞をTGF-β存在下で2継代以上培養することで両細胞に活性化（myofibroblast様形質転換）が誘導され、それが維持された。加えて、αSMAの発現、I型コラーゲン産生が確認された。さらに、JAK2-STAT3シグナルも肝星細胞の活性化に関与していることから、リガンドであるIL-6が肝星細胞の活性化にTGF-βと相加的に作用しうるか検討するため、TGF-βで活性化を誘導した肝星細胞株にIL-6を添加したところ、IL-6濃度依存的にJAK2-STAT3シグナルの活性化が確認され、αSMA発現量、I型コラーゲン産生量が増加することが確認された。一方、TGF-β によって活性化が維持された肝星細胞におけるSOCS3の発現量を活性化前と比較したところ、軽度ながら、活性化肝星細胞においてSOCS3の発現低下が認められた。加えて、IL-6添加によるSOCS3の発現量変化も検討したところ、SOCS3の発現誘導は認めず、JAK2-STAT3シグナルに対するネガティブフィードバック経路が作動していないことが示唆された。現在、このSOCS3の発現低下ならびにフィードバック不応が、メチル化によるエピジェネティックな抑制であるかについて、以下の検討を行っている。メチル化によるエピジェネティックな抑制を明らかにするため、脱メチル化剤の5-aza処理を行うことでSOCS3の発現が回復するか否かを検討したところ、発現の回復とIL-6添加による発現誘導が認められた。同時にαSMA発現量、I型コラーゲン産生量の低下が認められた。現在、活性化前後のSOCS3遺伝子プロモーター領域のメチル化の解析と活性化前後のDNA methyltransferaseの発現変化を検討中である。

Hepatostellate cell lines LX2 and HHSteCs were cultured for more than 2 generations in the presence of TGF-β, and the activation of myofibroblast was induced and maintained. The addition of αSMA, the development of type I SMA and the generation of type I SMA are confirmed. In addition, the activation of JAK2-STAT3 is related to the activation of hepatic stellate cells. IL-6 plays an additive role in the activation of hepatic stellate cells. The activation of TGF-β is induced in hepatic stellate cells. IL-6 concentration dependent activation of JAK2-STAT3 is confirmed. αSMA production. The increase in the production of type I crystals was confirmed. The activity of TGF-β was maintained in hepatic stellate cells, and the production of SOCS3 was lower than that of TGF-β before activation. SOCS3 detection and detection induced by addition of IL-6, JAK2-STAT3, and JAK2-STAT3 are the key factors for SOCS3 detection and detection. Now, SOCS3 is low in occurrence, low in growth, low in growth, low in inhibition, low in growth, low in growth, low in growth, 5-aza process for SOCS3 recovery At the same time, αSMA emission and I type SMA emission are low. Now, the analysis of SOCS3 gene expression before and after activation and the development of DNA methyltransferase before and after activation are discussed.