膵がん細胞の糖鎖切断を介した抗体医薬増強薬の開発

通过胰腺癌细胞中的聚糖裂解开发抗体药物增效剂

• 批准号: 21K08018
• 负责人: 中村 真男
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Sasaki Foundation
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08018/
• 关键词: 酵素的糖鎖改変; 糖鎖脱硫酸化酵素; グリコサミノグリカン; コンドロイチン硫酸; 分子アクセス制御; 糖鎖切断; 糖鎖分解酵素; 膵癌; 膵がん; 抗体医薬

膵がんでは膜タンパク質の糖鎖付加の異常が認められる。抗体医薬の対象となっている膜タンパク質は糖鎖修飾を受けており、その糖鎖を除去することで抗体医薬や抗がん剤への感受性が増大することが知られている。本研究は、膵がんの治療感受性を高める糖鎖切断酵素および糖鎖脱硫酸化酵素（以下、糖鎖改変酵素と呼ぶ）を腫瘍細胞に選択的に送達するために、キャリアとして抗体やタンパク質を利用して、抗体医薬の増強薬の開発を目指す。令和4年度は、膵がん細胞の表面に存在するグリコサミノグリカン (GAG)の組成分析を膵がん細胞株の種類を5株に増やして行った。コンドロイチン硫酸（CS）鎖の切断および脱硫酸化の効率を算出するCS染色法や膵がん細胞の増殖シグナルを評価する実験系を用いて、膵がん細胞表面に存在するCSユニットを酵素的に切断および脱硫酸化した際の影響を解析した。がん細胞に対する抗増殖活性を有するモデル分子（LF）の膵がん細胞へのアクセスが、CSユニットの酵素的な脱硫酸化で向上するかを評価した。膵がん細胞表面に存在するCS鎖を切断するコンドロイナーゼを培地に添加し、細胞増殖の抑制が5株中5株で認められた。CSユニットの特定の硫酸基を脱離する酵素（スルファターゼ）で膵がん細胞を処理した場合、5株中5株で細胞増殖の抑制が認められた。このスルファターゼは、マンノース受容体の細胞内動態に影響を及ぼし、細胞内に取り込まれることを見出した。膵がん細胞表面に存在するCS鎖の酵素的改変は、膵がん細胞へのモデル分子のアクセス向上において有効であることが示された。

胰腺癌在膜蛋白的糖基化中具有异常。作为抗体药物靶标的膜蛋白具有糖的修饰，众所周知，去除聚糖会增加对抗体药物和抗癌药物的敏感性。这项研究旨在使用抗体和蛋白质作为载体开发增强的抗体药物，以选择性地输送糖基化的酶和糖基化的脱硫酶（以下称为糖基化的链链修饰酶），从而增加了对胰腺癌对肿瘤细胞的敏感性的敏感性。在2022年，我们通过将胰腺癌细胞系的类型增加到五种，分析了胰腺癌细胞表面上存在的糖胺聚糖（GAG）的组成。使用CS染色方法计算硫酸软骨素（CS）链裂解和脱硫的效率，以及一个实验系统来评估胰腺癌细胞的增殖信号，我们分析了酶裂解和脱硫化的效果。我们评估了通过CS单位的酶脱硫对癌细胞抗癌细胞的模型分子（LF）是否可以增强癌细胞对胰腺癌细胞的访问。将裂解胰腺癌表面上CS链切割的软骨素酶加入培养基中，并在5种菌株中的5个菌株中抑制细胞增殖。当胰腺癌细胞用酶（硫酸酶）处理，该酶（硫酸酶）去除CS单位中的特定硫酸盐基团时，在5种菌株中的5个菌株中有5个细胞增殖被抑制。发现这种硫酸酶会影响甘露糖受体的细胞内动力学，并在细胞内服用。胰腺癌细胞表面上存在的CS链的酶促修饰已被证明可以有效增加对胰腺癌细胞模型的访问。

项目成果

ペプチドミクス研究部

肽组学研究部

酵素学的な糖鎖切断はヒト膵癌細胞株の増殖を制御する

酶促糖基化控制人胰腺癌细胞系的增殖

• 发表时间: 2022
• 作者: 中村 真男;千脇 史子;佐々木 博己;佐々木 一樹
• 通讯作者: 佐々木 一樹

糖鎖マイクロアレイを用いたラクトフェリン-糖鎖相互作用の解析と抗がん・神経再生への展開

利用聚糖微阵列分析乳铁蛋白-聚糖相互作用及其在抗癌和神经再生中的应用

• 发表时间: 2022
• 作者: 中村 真男;飯森 愛美;舘野 浩章;佐藤 淳
• 通讯作者: 佐藤 淳

酵素的糖鎖改変によるヒト膵癌細胞の増殖抑制効果

酶促聚糖修饰对人胰腺癌细胞生长的抑制作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 中村 真男;水本 秀二;山田 修平;千脇 史子;佐々木 博己;佐々木 一樹
• 通讯作者: 佐々木 一樹

中村 真男（Researchmap）

中村正雄（研究地图）