Analysis of immune response mechanisms of CTL and NK cells in HBV infection HBV infection

CTL和NK细胞在HBV感染中的免疫应答机制分析 HBV感染

• 批准号: 21K08006
• 负责人: 柘植 雅貴
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08006/
• 关键词: B型肝炎; 免疫応答; ヒト肝細胞キメラマウス; 抗ウイルス効果

マウス肝細胞の90%以上がヒト肝細胞に置換されたヒト肝細胞キメラマウス（以下、キメラマウス）に対し、B型肝炎ウイルス（HBV）genotype Cキャリアから採取した血清を接種し、HBV持続感染キメラマウスを作製。非感染マウス、感染3日後、10日後、5週間後、8週後、32週後にマウス肝組織より採取したヒト肝細胞を用いて、ヒト肝細胞内の遺伝子発現を次世代シークエンサーにて解析。HBV感染後、マウス血中のHBV DNA量は感染6～8週目にプラトーに達することから、非感染マウスの肝組織とHBV感染8週後のマウス肝組織における遺伝子発現の相違を検討したところ、両マウス群間で有意に発現が変化し、かつ2倍以上の発現変化を認めた遺伝子が225遺伝子抽出された。これらの遺伝子からmicroRNAやpseudo geneを除き、196遺伝子を抽出した。本研究では、HBV感染に伴う生体内のリンパ球への影響を解析することが目的であることから、抽出された遺伝子の情報を検索し、膜蛋白とされる28遺伝子、分泌蛋白とされる37遺伝子に解析対象を絞り込んだ。さらに、次世代シークエンス解析結果の再現性を確認するため、各time pointで回収したマウス肝組織より再度mRNAを抽出し、real time PCRを実施した。その結果、約70%の遺伝子において再現性が確認された。そこで、再現性が確認された遺伝子の機能について情報収集を行い、NK細胞や細胞傷害性T細胞の活性化に関与することが推定される遺伝子に解析対象を絞り、機能解析を開始した。

人肝细胞嵌合小鼠（以下称为嵌合小鼠），其中90％以上的小鼠肝细胞已被人类肝细胞代替，被从乙型肝炎病毒（HBV）（HBV）收集的血清接种，从而持续使用了旋转的小鼠，这些肝炎病毒（HBV）的生产型cantiper carripers持续染色。使用下一代测序仪，使用从小鼠感染后3、10、5、8和32周中收集的人肝细胞分析人肝细胞中的基因表达。 HBV感染后，小鼠血液中的HBV DNA量在感染6-8周时达到了高原，因此，当我们检查未感染小鼠的肝组织中基因表达的差异和HBV感染的小鼠肝组织中的225个基因时，提取了两组的表达，并在两组中显着改变。从这些基因中提取了196个基因，不包括microRNA和伪基因。在这项研究中，目的是分析HBV感染对体内淋巴细胞的影响，因此搜索了提取基因的信息，并将分析靶标缩小到28个基因，这些基因被认为是膜蛋白和37个基因，这些基因被认为是分泌蛋白。此外，为了确认下一代测序分析结果的可重复性，从每个时间点收集的小鼠肝组织再次提取mRNA，并进行实时PCR。结果，在约70％的基因中证实了可重复性。因此，收集了有关已确认为可重现的基因功能的信息，并通过将分析靶标缩小到假定与NK细胞激活和细胞毒性T细胞激活的基因开始。

项目成果

MafF Is an Antiviral Host Factor That Suppresses Transcription from Hepatitis B Virus Core Promoter

• DOI: 10.1128/jvi.00767-21
• 发表时间: 2021-08-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Ibrahim, Marwa K.;Abdelhafez, Tawfeek H.;Wakita, Takaji
• 通讯作者: Wakita, Takaji

KIF4A, a new host factor required for surface localization of NTCP, and HBV/HDV infection

KIF4A，NTCP 表面定位所需的新宿主因子，以及 HBV/HDV 感染

• 发表时间: 2021
• 作者: Gad SA;Sugiyama M;Tsuge M;Wakae K;Fukano K;Watanabe N;Kato T;Murayama A;Li Y;Shoji I;Shimotohno K;Chayama K;Muramatsu M;Wakita T;Nozaki T;Aly HH.
• 通讯作者: Aly HH.

Increasing incidence of non-HBV- and non-HCV-related hepatocellular carcinoma: single-institution 20-year study.

• DOI: 10.1186/s12876-021-01884-5
• 发表时间: 2021-07-31
• 期刊: BMC gastroenterology
• 影响因子: 2.4
• 作者: Nagaoki Y;Hyogo H;Ando Y;Kosaka Y;Uchikawa S;Nishida Y;Teraoka Y;Morio K;Fujino H;Ono A;Nakahara T;Murakami E;Yamauchi M;Okamoto W;Kawaoka T;Tsuge M;Hiramatsu A;Miki D;Imamura M;Takahashi S;Chayama K;Aikata H
• 通讯作者: Aikata H

培養細胞、ヒト肝細胞キメラマウスを用いた肝炎ウイルス研究

使用培养细胞和人肝细胞嵌合小鼠进行肝炎病毒研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 木村祐樹;奥村貴裕;坂本岳;小山雄一郎;伊藤亮太;風間信吾;平岩宏章;森本竜太;室原豊明;河合裕成 大澤陽介 考藤達哉;柘植 雅貴
• 通讯作者: 柘植 雅貴

HBV感染によるヒストン修飾と発癌との関連の検討

组蛋白修饰与 HBV 感染致癌关系的研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 柘植 雅貴;竹内泰江;茶山一彰
• 通讯作者: 茶山一彰