Viral nucleic acid components-based mechanisms of RSV-induced asthma exacerbation and the strategy for controlling the pathogensis

基于病毒核酸成分的RSV诱发哮喘加重的机制及控制发病策略

基本信息

批准号：
21K08168
负责人：
芦野滋
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

令和3年度に引き続き、RSウイルス感染によって誘導される喘息の急性増悪モデルマウスの構築を試み、気道過敏性、気道炎症を解析した。RSウイルスを気管支喘息マウスの肺内に投与することで、喘息の症状の一つである気道過敏性が亢進されることを確認した。また、肺組織では、免疫細胞である2型ヘルパーT (Th2) 細胞および2型自然リンパ球 (ILC2) の活性化が誘導されていることを確認した。しかしながら、それらTh2やILC2 の数的変動は軽微な傾向があるため、ウイルス感染後、経時的に肺組織内の免疫細胞群の経時変化を解析していく必要がある。また、別研究課題で、ウイルス核酸成分である double stranded RNA (dsRNA) の人工試薬を投与した際、dsRNA刺激に依存した喘息症状の増悪が確認され、dsRNAの受容体である toll-like receptor (TLR3) を介した経路が病態悪化に関係することが想定された。そこで、令和4年度は、TLR3 KOマウスの導入を行い、RSウイルスによる喘息症状の悪化が宿主細胞内のdsRNA刺激シグナルに依存しているという検証を進めた結果、一部 TLR3に依存する経路があるとわかった。さらに、RSウイルス感染状態のマウス肺内では、TSLP, IL-25, IL-33も検出され、気道上皮細胞の活性化あるいは細胞死が誘導されていることが推察され、気道上皮細胞とTh2やILC2といった免疫細胞群の相互作用も予想され、現在その評価系を構築中である。本年度では、動物飼育環境が変更になったことで生じた性差を含めたアレルゲン感受性やRSウイルス反応性、またRSウイルスのbatch差など、苦慮した点が生じた。

在2021财年之后，我们试图构建由RS病毒感染引起的哮喘的小鼠模型，并分析了气道高反应性和气道炎症。我们证实，在支气管哮喘小鼠的肺中给予RS病毒会增加气道高反应性，这是哮喘的症状之一。我们还证实，在肺组织中诱导了免疫细胞，2型辅助辅助物T（Th2）细胞和2型先天淋巴细胞（ILC2）的激活。但是，由于TH2和ILC2中的这些数值变化往往是温和的，因此有必要分析病毒感染后肺组织中免疫细胞的变化。在另一个研究主题中，当给予双链RNA（dsRNA）的摄影试剂（一种病毒核酸成分）时，确认了哮喘症状的加剧，哮喘症状取决于DSRNA刺激，并假定通过DSRNA受体（TLR3）的途径涉及病理发生。因此，在2022年，引入了TLR3 KO小鼠并测试，RS病毒引起的哮喘症状恶化取决于宿主细胞中的DSRNA刺激信号，我们发现存在一些依赖TLR3依赖性途径。此外，还在感染了RS病毒的小鼠的肺中检测到TSLP，IL-25和IL-33，据估计，诱导了气道上皮细胞的激活或细胞死亡，并且在诸如TH2和ILC2等诸如TH2和ILC2之类的空气道上和免疫细胞之间的相互作用以及当前的ILC2和ILC2之间的相互作用，并进行了评估。今年，发生了一些困难，包括过敏原敏感性，包括由动物育种环境变化，RS病毒反应性和RS病毒批次差异引起的性别差异。