気道に発現するムチン、MUC4は好中球性炎症の重症化を抑制する

MUC4 是一种在气道中表达的粘蛋白，可抑制中性粒细胞炎症的严重程度

• 批准号: 21K08163
• 负责人: 太田 洋充
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08163/
• 关键词: びまん性肺胞障害; MUC4; 好中球性炎症; lectin

2022年度は肺障害の原因となるMUC4の遺伝子多型を同定するため、次世代シークエンスを使用して遺伝子配列の解析を進めた。その結果、5つの遺伝子多型があることを示した。しかし、原因と考えられる特定の遺伝子多型（COS5）と肺障害との有為な相関関係が証明されなかった。ただし、コホート研究では肺障害の患者は必ずCOS5を持つことが判明した。これまでの検討により、MUC4は肺障害、つまり好中球性炎症の重症化を抑制する機能があり、COS5はを好中球の過剰な炎症を抑制できなくなる”モデルを想定しているが、このモデルに矛盾ない結果と考えている。また、患者由来のMUC4（COS5、R5）を導入した気道上皮細胞（BEADS2B）、正常人由来のMUC4（W3,R6）を導入した気道上皮細胞を作成した。さらにMUC4の糖鎖であるα鎖を分離し回収し、western　blottingにより確認した。ヒト血液から好中球を分離し、MUC4の糖鎖部分を添加することにより、好中球の機能に対する作用を検討している。また、好中球エラスターゼによりヒト初代気道上皮細胞に膜型のムチンであるMUC1,MUC４の発現が誘導することをReal Time PCRを用いてmRNAで、また、Western blottingを使用してタンパクレベルで証明した。さらに、TNFα、IFNγ、TGF-β、LPS、IL-6などを添加し炎症あるいは抗炎症サイトカインによるMUC1,MUC4の発現調節により検討を加えている。

在2022年，我们使用下一代测序分析了基因序列，以鉴定MUC4的遗传多态性，从而导致肺损伤。结果表明有五种基因多态性。但是，证明可能是因果诱导并证明肺损害的特定遗传多态性（COS5）之间没有显着相关性的。但是，队列研究发现肺损伤患者始终患有COS5。迄今为止已经进行了先前的研究，MUC4具有抑制肺损伤的功能，即中性粒细胞炎症，COS5无法抑制中性粒细胞的过度炎症，但我们认为该模型与该模型一致。我们还创建了使用患者衍生的MUC4（COS5，R5）和AIRWAY上皮细胞引入的气道上皮细胞（Beads2b），这些细胞已与正常的人类MUC4（W3，R6）一起引入。此外，分离并收集了α链，即MUC4的糖链，并通过蛋白质印迹确认。从人体血液中分离中性粒细胞，并添加MUC4的聚糖部分以检查对中性粒细胞功能的影响。此外，中性粒细胞弹性蛋白酶在人原发性气道上皮细胞中诱导膜型粘蛋白MUC1，MUC4的表达。使用PCR和Western印迹在蛋白质水平上证明了结果。此外，添加了TNFα，IFNγ，TGF-β，LPS，IL-6等，以通过炎症或抗炎细胞因子来调节MUC1和MUC4的表达。

项目成果

MUC4遺伝子多型とEGFR-TKIによるILD発症との相関性を検証するためのコホート内ケースコントロールスタディ-NEJ022A-結果報告

队列内病例对照研究验证MUC4基因多态性与EGFR-TKI诱导的ILD发展之间的相关性 - NEJ022A - 结果报告

• 发表时间: 2023
• 作者: Satoshi Shoji;Shun Kohsaka;Yasuyuki Shiraishi;Takashi Kohno;Mitsuaki Sawano;Nobuhiro Ikemura;Nozomi Niimi;Yuji Nagatomo;Toshikazu D Tanaka;Makoto Takei;Tomohiko Ono;Munehisa Sakamoto;Shintaro Nakano;Iwao Nakamura;Soushin Inoue;Keiichi Fukud;玉田 勉;萩原弘一
• 通讯作者: 萩原弘一

正常気管支上皮細胞におけるMUC4の発現調節

正常支气管上皮细胞MUC4表达的调控

• 发表时间: 2023
• 作者: Noriko Ouji-sageshima;Masahiro Kitabatake;Ryutaro Furukawa;Toshihiro Ito.;野村基子 太田洋充 椎原淳 前田悠希 長井良昭 萩原弘一 山口泰弘
• 通讯作者: 野村基子 太田洋充 椎原淳 前田悠希 長井良昭 萩原弘一 山口泰弘