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molecular genetic analyses of a family with hereditary hypo Mg, hypo K ,and hypertension

遗传性低镁、低钾、高血压家系的分子遗传学分析

基本信息

批准号：
21K08277
负责人：
貝森淳哉
金额：
$ 1.5万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者らは、電解質異常をもつ高血圧患者家系の遺伝子解析を行い、ANK3 p.E865K変異を見出した。HEK293細胞に野生型ANK3と本症例の変異ANK3を遺伝子導入した。野生型に比し、変異型Ankyrin-3の発現量は顕著に増加していた。Ankyrin-3の半減期をcycloheximide chase assayで評価したところ、野生型に比して変異型Ankyrin-3の半減期は延長していた。したがって変異型Ankyrin-3の発現増加は分解の抑制によるものと考えられた。Ankyrin-3のアミノ酸配列にはユビキチンE3リガーゼCDC20の認識部位であるD-box、KEN-boxが含まれる。したがって、Ankyrin-3の細胞内分解はCDC20によるユビキチン化が関与していることが予想された。実際にCDC20 shRNAによるCDC20のノックダウンはAnkyrin-3発現を増加させた。また、野生型Ankyrin-3に比し、変異型Ankyrin-3はCDC20との結合が減少するとともに、ユビキチン化や蛋白分解産物の減少が免疫沈降法で確認された。また、本変異を持つknock-in mouseを作成したところ、尿細管DCT1部位にankyrin-3蛋白の発現増強が認められ、Enac alpha, beta,gammaの発現も増強が認められた。また、血清KおよびMgの濃度低下を認め、塩分普通食の条件下でも、WT mouseに比べて有意な血圧上昇を認めた。

The applicants and the patients with high blood pressure were often checked by the applicant, the family members of the patients with high blood pressure were analyzed, and the patients with high blood pressure were registered by ANK3 p.E865K. HEK293 cell wild-type ANK3. In this case, the disease is complicated by ANK3 infection. Wild-type and wild-type Ankyrin-3 were used to measure the number of animals. The half-cycle of Ankyrin-3 was longer than that of wild-type and wild-type Ankyrin-3 in half-cycle. This is the first time that the Ankyrin-3 has been added to suppress the decomposition. Ankyrin-3