腸内細菌のANCA関連腎炎への免疫学的関与の解明と病態制御への応用

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本研究は、MPO-ANCA(Myeloperoxidase Anti-neutrophil Cytoplasmic Antibody)関連腎炎モデルマウスを作製し、一部の腸内細菌に誘導される制御性T細胞（Treg）をはじめとする抗炎症性免疫応答の、腎炎の病勢に与える保護的な影響について検討することを目的としている。MPO-ANCA関連関連腎炎モデルマウス作製方法として、MPO K.O.マウスを導入し、これにマウスMPO+Adjuvantで免疫したのち、マウスMPOを尾静脈より投与しMPOに対する免疫グロブリンの産生を誘導する。このマウスから得られた血清よりMPO-ANCAを抽出・精製し、野生型マウスに腹腔内投与し腎炎を惹起させる。この方法を試みたところ、試験紙法で尿潜血陽性、腎病理においてメサンギウム細胞の増殖・基質の増加、一部の糸球体で半月体形成を確認できた。一方で、対照群と比較し尿蛋白量と腎機能障害の程度は腎炎モデルマウスとしては不十分であり、現在はMPO K.O.マウスの繁殖・免疫を継続しつつ、より適正な腎炎の病勢を得るため、投与量や投与回数などについて検討中である。また、制御性T細胞（regulatory T cell:Treg）の誘導について、マウス腸内細菌叢からTregを誘導する菌群の分離に取り組んでいる。すなわち、マウス盲腸内容物を採取し、嫌気環境下でクロロホルム処理することで芽胞形成菌群を分離し、特に短鎖脂肪酸産生菌としてTregを誘導するとされる一部のClostridium属の分離を試みている。この菌群を無菌マウスに経口移植し定着させ、SPFマウスに近いレベルにまでTregが誘導されるかを確認していく予定である。現時点では一部の通性嫌気性菌が残存しており、引き続き目的とする菌の分離を行い、Tregの誘導能を確認していく。