Activation peptide of coagulation factor IX protects vascular endothelial cells

凝血因子IX激活肽对血管内皮细胞的保护作用

• 批准号: 21K08380
• 负责人: 日だい 智明
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08380/
• 关键词: 炎症; 虚血; 凝固因子; STAT3; interleukin 6; 脳梗塞; 凝固第IX因子; activation peptide; 血管内皮細胞

血液凝固第九因子（FIX）は流血中を循環しているタンパクで、創傷が生じるとactivation peptide（F9-AP）が切断されて活性化し、血液を凝固させる。我々は、非活性型のFIXやF9-APが血管内皮の透過性を抑制することを発見した。また、化学合成したF9-APを静脈内投与することにより、敗血症モデルでの肺水腫や脳外傷モデルでの脳浮腫が改善することを示した。本研究では、in vitro、in vivoの虚血モデルや炎症モデルを使用し、F9-APがinflammaraftの形成を阻害し、同時に複数のシグナル伝達を抑制することを示す。また、F9-APの投与が、脳虚血モデルにおいて治療的に有効であるか検討する。当該年度には、虚血や炎症で重要な役割を担う血管内皮細胞を培養し、covid-19でも血管障害の主たる因子と考えられているinterleukin6（IL6）刺激に対するF9-APの効果を検討した。ヒト臍帯静脈内皮細胞に対してIL6を投与し、IL6の下流で働く転写因子STAT３の局在を免疫染色で確認した。対照群では、STAT3はIL6刺激により核内に移行したが、F9-APの添加はそれを抑制した。ウエスタンブロットで、タンパク量を評価したところ、F9-APの添加によるSTAT３総量の増減はなかった。従って、F9-APは、STAT3の核移行を抑制して、IL6のシグナルを抑制すると考えられた。炎症による血管障害には凝固亢進がつきものである。内皮細胞の凝固反応で活性化されるトロンビンを添加し、F9-APの効果を調べた。F9-APは、トロンビンによるRho-ROCK系シグナルを阻害し、細胞骨格のリモデリングを抑制した。これらの結果から、F9-APが独立した複数の炎症に関するシグナルを抑制するという仮説が実証された。

Blood coagulation factor IX (FIX) is circulating in bleeding, wound formation and activation peptide (F9-AP) is cut off and activated, and blood coagulation occurs. The results showed that F9-AP, an inactive FIX, inhibited the permeability of vascular endothelium. Chemical synthesis of F9-AP by intravenous administration of F9-AP, pulmonary edema by blood poisoning, and edema by trauma. This study demonstrates the use of F9-AP in vitro and in vivo to inhibit the formation of inflammaraft and to inhibit the formation of multiple inflammatory pathways. F9-AP is administered to patients with acute respiratory syndrome. In this year, vascular endothelial cell culture, covid-19 and vascular barrier factors were examined in response to interleukin-6 (IL-6) stimulation. The expression of IL-6 in umbilical vein endothelial cells was confirmed by immunostaining. In contrast, STAT3 and IL6 stimulate nuclear migration, and F9-AP addition is inhibited. The amount of F9-AP added to STAT3 was reduced. F9-AP, STAT3, IL6, and IL-4 are all inhibited by nuclear migration. Inflammation, vascular damage, coagulation, hyperactivity, The coagulation reaction of endothelial cells can be activated by adding thrombin to adjust the effects of F9-AP. F9-AP inhibits the proliferation of cells in the Rho-ROCK system. F9-AP is independent of the results of this study.

项目成果

Activation peptide of coagulation factor IX improves the prognosis after traumatic brain injury

凝血因子IX激活肽改善脑外伤后的预后

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2021.06.089
• 发表时间: 2021
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun .
• 作者: Yuusuke Fujiwara ;Hisataka Kitano ;Takamitsu Yamamoto ;Shinichiro Kokubun ;Chiaki Hidai
• 通讯作者: Chiaki Hidai