Activation peptide of coagulation factor IX protects vascular endothelial cells

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血液凝固第九因子（FIX）は流血中を循環しているタンパクで、創傷が生じるとactivation peptide（F9-AP）が切断されて活性化し、血液を凝固させる。我々は、非活性型のFIXやF9-APが血管内皮の透過性を抑制することを発見した。また、化学合成したF9-APを静脈内投与することにより、敗血症モデルでの肺水腫や脳外傷モデルでの脳浮腫が改善することを示した。本研究では、in vitro、in vivoの虚血モデルや炎症モデルを使用し、F9-APがinflammaraftの形成を阻害し、同時に複数のシグナル伝達を抑制することを示す。また、F9-APの投与が、脳虚血モデルにおいて治療的に有効であるか検討する。当該年度には、虚血や炎症で重要な役割を担う血管内皮細胞を培養し、covid-19でも血管障害の主たる因子と考えられているinterleukin6（IL6）刺激に対するF9-APの効果を検討した。ヒト臍帯静脈内皮細胞に対してIL6を投与し、IL6の下流で働く転写因子STAT３の局在を免疫染色で確認した。対照群では、STAT3はIL6刺激により核内に移行したが、F9-APの添加はそれを抑制した。ウエスタンブロットで、タンパク量を評価したところ、F9-APの添加によるSTAT３総量の増減はなかった。従って、F9-APは、STAT3の核移行を抑制して、IL6のシグナルを抑制すると考えられた。炎症による血管障害には凝固亢進がつきものである。内皮細胞の凝固反応で活性化されるトロンビンを添加し、F9-APの効果を調べた。F9-APは、トロンビンによるRho-ROCK系シグナルを阻害し、細胞骨格のリモデリングを抑制した。これらの結果から、F9-APが独立した複数の炎症に関するシグナルを抑制するという仮説が実証された。