TKI治療抵抗性の慢性骨髄性白血病細胞に対する新規治療戦略の開発

开发针对 TKI 治疗耐药的慢性粒细胞白血病细胞的新治疗策略

• 批准号: 21K08406
• 负责人: 高久 智生
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08406/
• 关键词: ミトコンドリアの断片化; ゴーストサイトメトリー; 慢性骨髄性白血病; DRP1; チロシンキナーゼ阻害薬治療抵抗性; チロシンキナーゼ阻害薬; 治療抵抗性

慢性骨髄性白血病(CML)は、2000年のチロシンキナーゼ阻害薬(TKI)の開発により患者の予後は大きく改善した。さらに現在では計5種類のTKIがCML診療に用い られており、既にCMLは患者の予後を規定する因子ではなくなっている。しかし、TKI治療によるCML患者の10年生存率は90%程度である一方で、TKI治療の中止に よりその多くが再発してしまい、依然としてTKI治療中止後の寛解維持率はCML患者全体では10から20%程度と大きく限定されている。これは、TKI治療後も極少量 のCML細胞が残存している事が原因であると考えられており、本研究の目的はTKI治療後も残存するCML細胞を1細胞レベルで分取し、それら残存細胞に特異的な RNA発現プロファイルを明らかにすることで、治療抵抗性のCML細胞を標的とした新規の治療戦略の構築に必要な知見を得ることである。今年度はTKI治療が奏功 した患者の骨髄からCD34陽性、CD38陰性の造血幹細胞を含む細胞集団をセルソーターで96ウェルプレートに1細胞ごとに分取した上で、RT-RamDA法を用いてBCR- ABLの検出を行った。結果として、BCR-ABL陽性細胞株であるK562を用いた実験では1細胞での分取および抽出したRNAを用いてBCR-ABLの検出に成功した。続くステップとして患者骨髄 の保存細胞で同様の実験を行うも、患者骨髄の保存細胞では細胞のバイアビリティの低下、さらには個々の患者によりBCR、ABLの切断点が異なっている可能性が考えられたため、検 出方法の変更および新たにゴーストサイトメトリーを導入した。ゴーストサイトメトリーは細胞内小器官の微小変化を検出可能で、BCR-ABL1染色体を導入した細胞株および患者検体を用いた鑑別を行ったところ、高精度で腫瘍細胞の鑑別が可能であった。

Chronic Osteopathic Leukemia (CML): The development of TKI in 2000 has led to significant improvement in patients. There are currently five types of TKI that are used in the diagnosis and treatment of CML, and which are used to determine the prognosis of CML patients. The 10-year survival rate of CML patients treated with TKI decreased from 90% to 10%, and the survival rate of CML patients treated with TKI decreased from 20% to 10%. The purpose of this study is to isolate and isolate CML cells that remain after TKI treatment, and to identify specific RNA expression in the remaining cells. This year, TKI treatment has been successful in patients with bone marrow disease, including CD34-positive and CD38-negative hematopoietic stem cells. The results showed that BCR-ABL positive cell line K562 was successfully isolated by PCR. The patient's bone preservation cells are the same as those of the patient's bone preservation cells, and the patient's bone preservation cells are low and low. The patient's bone preservation cells are different from those of the patient's bone preservation cells. It is possible to identify small organs in cells, introduce BCR-ABL1 chromosome into cells, and identify tumor cells with high accuracy.

项目成果

AIを搭載したゴーストサイトメトリーによる末梢血CML細胞の鑑別

配备AI的鬼血细胞仪对外周血CML细胞的分化

• 发表时间: 2022
• 作者: Uhara H;Kiyohara Y;Uehara J;Fujisawa Y;Takenouchi T;Otsuka M;Uchi H;Fukushima S;Minami H;Hatsumichi M;Yamazaki N.;鈴木行人
• 通讯作者: 鈴木行人

ゴーストサイトメトリーを用いた非標識白血病細胞の判別性能の検証と、その形態・機能解析

鬼细胞术验证未标记白血病细胞的辨别性能并分析其形态和功能

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木行人

CML細胞における細胞内小器官の機能および形態分析

CML细胞内细胞器的功能和形态学分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 野村 史絵、西部 明子;牛上 敢;二ツ谷 剛俊;池村 渓伺;八田 順子;望月 隆;南部 昌之;石井 文人;橋本 隆;Hide M;高久智生
• 通讯作者: 高久智生