Elucidation of the NK cell immune escape mechanism using iPS cell-derived platelets and development of treatment

高度の血小板減少症では重篤な出血の予防や治療のために献血血小板の輸血が行われるが、血小板のHLAクラスIに対する同種抗体によって輸血患者の約5％では拒絶されてしまう。この様な血小板輸血不応症に対するユニバーサルな対策法としてHLAクラスI欠失血小板の開発が進んでおり、申請者は臨床製造が可能なiPS細胞由来血小板製造システムを用いてHLAクラスI欠失iPS細胞由来血小板を製造した。免疫原性の検証を行ったところ、他のHLAクラスI欠失細胞と異なり血小板はNK細胞に攻撃されないことを見出したが、その機序は不明であった。そこで本研究では、ヒト血小板が保持するHLA分子の有無とは独立したNK細胞に対する免疫逃避メカニズムを解明することを目的としている。令和4年度はiPS血小板とその母細胞である巨核球株imMKCLの2セットのプロテオミックス解析の発現プロフィールのバイオインフォマティック解析から同定された、iPS血小板により高発現する免疫抑制性分子について、阻害抗体や阻害化合物等を用いたインビトロ共培養実験で機能検証を進め、TGFβを始めとする複数の分子の寄与を明らかにしつつある。NK細胞との相互作用を観察するライブ動態解析では、iPS細胞由来血小板およびimMKCLで異なる動体を観察しえた。また内在的にヒトNK細胞が発生させたヒト化マウスにおいて、HLAクラスIを欠失させたimMKCLや造血前駆細胞が、ヒトNK細胞の再構成レベルによって拒絶されるデータを取得し、インビボモデルとして適切であることが確認できた。

高度の血小板減少症では重篤な出血の予防や治療のために献血血小板の輸血が行われるが、血小板のHLAクラスIに対する同種抗体によって輸血患者の約5％では拒絶されてしまう。この様な血小板輸血不応症に対するユニバーサルな対策法としてHLAクラスI欠失血小板の開発が進んでおり、申請者は臨床製造が可能なiPS細胞由来血小板製造システムを用いてHLAクラスI欠失iPS細胞由来血小板を製造した。免疫原性の検証を行ったところ、他のHLAクラスI欠失細胞と異なり血小板はNK細胞に攻撃されないことを見出したが、その機序は不明であった。そこで本研究では、ヒト血小板が保持するHLA分子の有無とは独立したNK細胞に対する免疫逃避メカニズムを解明することを目的としている。令和4年度はiPS血小板とその母細胞である巨核球株imMKCLの2セットのプロテオミックス解析の発現プロフィールのバイオインフォマティック解析から同定された、iPS血小板により高発現する免疫抑制性分子について、阻害抗体や阻害化合物等を用いたインビトロ共培養実験で機能検証を進め、TGFβを始めとする複数の分子の寄与を明らかにしつつある。NK細胞との相互作用を観察するライブ動態解析では、iPS細胞由来血小板およびimMKCLで異なる動体を観察しえた。また内在的にヒトNK細胞が発生させたヒト化マウスにおいて、HLAクラスIを欠失させたimMKCLや造血前駆細胞が、ヒトNK細胞の再構成レベルによって拒絶されるデータを取得し、インビボモデルとして適切であることが確認できた。