遺伝子変異を伴わないトロンボポエチン受容体の自律的活性化メカニズムの解明

フィラデルフィア染色体陰性の骨髄増殖性腫瘍(MPN)は、加齢により造血幹・前駆細胞に体細胞変異が生じ、血球の異常増加や骨髄の線維化を呈する造血器腫瘍である。MPN患者の大部分で、MPN発症を引き起こすドライバー遺伝子変異が見出されるが、変異が検出されないtriple-negative(TN)症例が存在する。TN症例ではドライバー遺伝子変異が見出されず、診断に難渋するため、TN-MPN症例の診断に有効な新たなマーカーの同定と、発症メカニズムの解明が求められている。これまでに研究代表者らは、大部分のTN-MPN症例では体細胞変異が見いだされないこと、TN-MPN患者の造血幹細胞が自律的に巨核球に分化すること、培養細胞において遺伝子変異を伴わずとも、巨核球造血を促すMPLシグナル伝達経路の自律的な活性化が生じることを明らかにしている。本年度は、昨年度行ったRNA-seq解析結果をもとに、TPO非依存性に増殖するBa/F3-MPL-FR細胞のRNA、または、TN-MPN患者の血小板RNAにおいて、発現が増加した複数の候補遺伝子の機能評価を行った。これらの遺伝子は、サイトカイン受容体との相互作用が報告されている分子や細胞膜周辺で機能している分子をコードする遺伝子である。この結果、発現抑制によりBa/F3-MPL-FR細胞増殖が強く抑制される遺伝子を見出したが、これらの遺伝子の発現抑制は、MPL下流シグナル分子の一つであるSTAT5の活性化に関与していなかった。よって、今回解析した候補遺伝子はBa/F3-MPL-FR細胞のMPL活性化による自律的増殖に関与している可能性は低いと考えられた。

フィラデルフィア染色体陰性の骨髄増殖性腫瘍(MPN)は、加齢により造血幹・前駆細胞に体細胞変異が生じ、血球の異常増加や骨髄の線維化を呈する造血器腫瘍である。MPN患者の大部分で、MPN発症を引き起こすドライバー遺伝子変異が見出されるが、変異が検出されないtriple-negative(TN)症例が存在する。TN症例ではドライバー遺伝子変異が見出されず、診断に難渋するため、TN-MPN症例の診断に有効な新たなマーカーの同定と、発症メカニズムの解明が求められている。これまでに研究代表者らは、大部分のTN-MPN症例では体細胞変異が見いだされないこと、TN-MPN患者の造血幹細胞が自律的に巨核球に分化すること、培養細胞において遺伝子変異を伴わずとも、巨核球造血を促すMPLシグナル伝達経路の自律的な活性化が生じることを明らかにしている。本年度は、昨年度行ったRNA-seq解析結果をもとに、TPO非依存性に増殖するBa/F3-MPL-FR細胞のRNA、または、TN-MPN患者の血小板RNAにおいて、発現が増加した複数の候補遺伝子の機能評価を行った。これらの遺伝子は、サイトカイン受容体との相互作用が報告されている分子や細胞膜周辺で機能している分子をコードする遺伝子である。この結果、発現抑制によりBa/F3-MPL-FR細胞増殖が強く抑制される遺伝子を見出したが、これらの遺伝子の発現抑制は、MPL下流シグナル分子の一つであるSTAT5の活性化に関与していなかった。よって、今回解析した候補遺伝子はBa/F3-MPL-FR細胞のMPL活性化による自律的増殖に関与している可能性は低いと考えられた。