喘息病態における好酸球ETosisと気道上皮細胞の相互作用に関する分子生物学検討

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喘息患者の気道上皮周囲には好酸球の集積が多数みられることが知られている。好酸球は気道局所で活性化し、ETosisをきたすことが考えられる。ETosisをきたした好酸球からは、galectin-10や細胞外トラップとして知られる、DNA Trapsが放出されることが報告されている。喘息の炎症局所では、気道上皮細胞と好酸球の相互作用によって、気道上皮細胞からのサイトカイン産生や粘液産生機構に影響がある可能性がある。本研究では、気道上皮細胞と活性化によりETosisをきたした好酸球との相互作用について研究を行う。2022年度は、好酸球ETosisによって放出されるDNA trapsが気道上皮細胞の細胞機能に与える影響について検討した。具体的には、ウェルプレート上でPMAにより好酸球を刺激しETosisを引き起こす。その後DNA trapsを溶解するDNase添加群、非添加群に分け、パラホルムアルデヒドを用いて固定を行う。その状態で気道上皮細胞株NCI-H292を発育させ、24時間後の形態変化を観察した。その結果、ウェルプレート上にDNA trapsが存在している群では、気道上皮細胞の発育が悪く、DNA trapsが気道上皮細胞の発育に関与することが示唆された。加えて培養上清についてBioplexを用いて気道上皮細胞からのサイトカイン産生について、検討した。その結果DNA traps存在群にてTSLPやIL-8の産生が亢進していた。特にTSLPは近年喘息病態への関与が注目されており、好酸球と気道上皮細胞の相互作用によってTSLP産生が亢進することは、好酸球性炎症による喘息病態の解明にも関わる重要な知見であると考えている。