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Analysis of molecular mechanisms of metabolic disorders caused by de-coupling Glucose/Fructose metabolism.

葡萄糖/果糖代谢解偶联引起代谢紊乱的分子机制分析。

基本信息

批准号：
21K08542
负责人：
満島勝
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Center for Global Health and Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1.AldolaseBノックアウトマウスの解析本年度は、AldoBKOマウスの代謝表現型について解析を行った。フルクトース除去食飼育条件下で経口ブドウ糖負荷による耐糖能試験、インスリン皮下投与によるインスリン感受性試験、また肝糖新生能を皮下投与によるピルビン酸負荷試験、グリセロール負荷試験、グルカゴン負荷試験をそれぞれ行った。驚いたことに、AldoBKOマウスでは耐糖能が改善しており、初期血中インスリン値に変化がないことからインスリン感受性の改善が推測された。予想通り、インスリン感受性試験によりAldoBKOマウスではインスリン感受性の改善がみられた。また、グルカゴン負荷試験では両群には大きな差が見られなかったが、糖新生基質を投与した場合においてAldoBKOマウスでは血糖上昇が抑えられていた。この可能性として、①AldoBが糖新生の重要な酵素として機能すること、②インスリン感受性の改善により糖新生が抑制されたこと、などが考えられた。また、絶食時肝臓における様々な遺伝子の発現をq-PCRにより確認したところ、AldoBKOマウスの肝臓では摂食時に発現が高い多くの遺伝子がコントロールに比べ高い発現を示していた。このことは、AldoB欠損により絶食肝においてもインスリン応答性遺伝子の発現が促進されていることを示唆するものであり、今後そのメカニズムを解析する予定である。2.初代培養肝細胞を用いたフルクトース不耐症の解析前年度にAldoBKOマウス由来の初代培養肝細胞を用いた解析より、フルクトース添加によって細胞内のATP減少、AMPK活性化、糖新生の抑制がみられたが、阻害剤実験よりAMPK活性化が糖新生抑制の原因ではないと考えられた。そこで、細胞内で蓄積がみられるF-1Pに標的分子の検討を行ったところ、AldoAがF-1Pと結合することが分かった。現在詳細な解析を行っている。

1. AldolaseB The glucose tolerance test, the glucose sensitivity test, the liver glucose regeneration test, the glucose load test, the glucose load test, and the glucose load test were all performed under the condition of food removal. AldoBKO can improve glucose tolerance, and it is speculated that the sensitivity of glucose tolerance can be improved in the early stage of blood glucose tolerance. To understand, to change the sensitivity test, to change the sensitivity test The blood sugar level in the blood glucose test was significantly higher than that in the control group. AldoB is an important enzyme for sugar production. AldoB is a sensitive enzyme for sugar production. Q-PCR was used to confirm the presence of the gene in the liver during hunger strike, and the presence of the gene in the liver during hunger strike was higher than that in the liver. This is the first time that a person's brain has been damaged. 2. Analysis of primary culture hepatocytes for use in the study of the causes of AldoBKO intolerance Analysis of primary culture hepatocytes for use in the study of the causes of ATP reduction, AMPK activation, and inhibition of glycogenesis in primary culture hepatocytes for use in the study of the causes of AMPK activation and inhibition of glycogenesis The expression of F-1P in cells was detected by PCR. Detailed analysis of the line is now available.