心停止肝に対する、酸素化灌流とMuse細胞移植を融合した臓器修復再生法の開発

氧灌注与Muse细胞移植相结合的心脏骤停肝脏器官修复再生方法的建立

基本信息

批准号：
21K08636
负责人：
宮城重人
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

正常肝のラット20％過小グラフト移植モデルを作成し、こちらにヒトMuse 細胞および間葉系幹細胞（MSC)のブースト細胞移植モデルを付加する研究を継続した。ブースト移植細胞数を、MSC40万個、Muse40万個、MSC500万個（MSC500万個中にMuse40万が存在すると想定できる）で比較検討を継続した。過小グラフト肝移植＋ブースト細胞移植のモデルは既に当科で確立されているため、生存率には有意差が出なかったのは報告済である。しかし肝再生速度と肝代謝能力（ICG検査）の検討にてMuse40万個移植群は他群に比し有意にICG消失率が良好であった。ICG検査が、MSC500万群で改善が不十分なのにMuseだけ改善した理由として、肝臓内の血流が改善した可能性を考え（MSC500万群では細胞数が多すぎてかえって類洞閉塞した可能性を考えた）、臓器透明化技術を用いて肝類洞画像を撮影した。術後3日目のラットに蛍光標識デキストランを注射し、肝臓を摘出後、4%PFAにて浸漬固定。そのごCUBIC protocolを用い肝臓を透明化し多光子共焦点レーザー顕微鏡にて3次元類洞画像を撮影。ImageJによる連続した平均類洞体積・表面積測定にて、類洞の開存性および連続性がMuse細胞40万投与でMSCに比し有意に改善していることが解った。さらに、Muse細胞はMSCと比較してHGF、VEGFAを高発現していることが新たに分かった。このためMuse細胞の類洞保護効果がHGFやVEGFAによるものと想定できた。心停止ドナー肝グラフトに酸素化灌流を施行する類洞保護モデルもラットとブタで確立した。ラットにて心停止ドナー無処置再灌流群と酸素化後の再灌流群で比較研究を開始した。また酸素化後の再灌流時に細胞ブーストを行う実験モデルも確立した。

我们创建了一个正常肝脏的20％的下种植大鼠植入模型，并继续研究添加人类缪斯细胞和间充质干细胞（MSC）的增强细胞植入模型。将增强的移植细胞的数量与400,000 MSC，400,000次缪斯和500万MSC进行比较（可以假定在500万MSC中存在脉搏）。作为在我们的部门已经建立了肝移植和增强细胞移植的模型，据报道，存活率没有显着差异。但是，在检查肝脏再生率和肝脏代谢能力（ICG测试）时，Muse 400,000移植组的ICG损失率明显优于其他组。当MSC 500万组改善较差时，ICG测试仅改善缪斯的原因是，肝脏内的血流有所改善（MSC 500万组具有太多细胞，并且可能被正弦障碍物阻塞），并且使用构造清除技术拍摄了肝窦图像。手术后的第三天，将大鼠注射荧光标记的右旋烷，并去除肝脏，然后浸入4％PFA中。肝脏使用立方方案是透明的，并使用多光子共聚焦激光显微镜拍摄3D正弦图像。使用ImageJ的连续平均正弦体积和表面积测量结果表明，与40万Muse细胞给药的MSC相比，正弦细胞的通畅和连续性显着提高。此外，新发现，与MSC相比，Muse Cells表达了高HGF和VEGFA。因此，假定缪斯细胞的正弦保护作用是由HGF和VEGFA引起的。在大鼠和猪中还建立了用于执行心脏骤停供体肝脏供体肝脏供体肝脏供体灌注的正弦保护模型。在没有心脏骤停供体的再灌注组的大鼠中开始了比较研究，在氧合后的再灌注组中开始了比较研究。还建立了一个实验模型，其中还建立了在氧合后再灌注期间发生细胞的促进模型。

项目成果

期刊论文数量（13）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

局所進行肝門部領域胆管癌に対する肝移植の適応と生体移植用治療戦略

局部晚期肝门部胆管癌肝移植适应证及活体移植治疗策略

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
宮城重人;藤尾淳;戸子台和哲;柏舘俊明;宮澤恒持;佐々木健吾; 松村宗幸;宮崎勇希;山名浩樹;青木修一;中川圭;森川孝則亀井尚;海野倫明
通讯作者：
海野倫明

Oxygenated Hypothermic Machine Perfusion of Kidney Transplantation from Donors After Cardiac Death Due to Long-Term Low Blood Pressure and Hypoxia: The First Case Report of a Clinical Trial Using a New Japanese Perfusion System.

长期低血压和缺氧导致心脏死亡后供体肾移植的氧合低温机灌注：使用新型日本灌注系统的临床试验的首例病例报告。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
Transplant Proc. 2022 Mar;54(2):225-229.
影响因子：
0
作者：
Shigehito Miyagi 1;Toshiaki Kashiwadate 2;Hiroyasu Nishimaki 2;Kazuaki Tokodai 2;Atsushi Fujio 2;Koji Miyazawa 2;Kengo Sasaki 2;Muneyuku Matsumura 2;Michiaki Unno 2;Takashi Kamei 2;Naoto Matsuno.
通讯作者：
Naoto Matsuno.

心停止ドナー肝移植にむけた灌流研究をベースとした東北大学の歩み

东北大学心脏骤停供体肝移植灌注研究取得进展

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
宮城重人;柏舘俊明;柿崎裕太;米田海;宮澤恒持;王宏昇;清水健司;笹嶋秀憲;菖野佳浩;西牧宏泰;滝戸成人;戸子台和哲;藤尾淳;佐々木健吾;松村宗幸; 亀井尚;海野倫明
通讯作者：
海野倫明

局所進行肝門部領域胆管癌に対する肝移植適応の検討

局部晚期肝门部胆管癌适应肝移植的思考

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
宮城重人;戸子台和哲;藤尾淳;柏舘俊明;宮澤恒持; 佐々木健吾;松村宗幸;宮崎勇希;山名浩樹;青木修一;中川圭; 亀井尚;海野倫明
通讯作者：
海野倫明

The first report of a Japanese clinical trial for oxygenated hypothermic machine perfusion on for kidney transplantation from donors after cardiac death.

日本第一份临床试验报告，用于心脏死亡后供体肾移植的氧合低温机灌注。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shigehito Miyagi1;Toshiaki Kashiwadate1;Hiroyasu Nishimaki1;Kazuaki Tokodai1;Wataru Nakanishi1;Ryuichi Nishimura1;Atsushi Fujio1;Kengo Sasaki1;Michiaki Unno1;Takashi Kamei1;and Naoto Matsuno2
通讯作者：
and Naoto Matsuno2