心停止肝に対する、酸素化灌流とMuse細胞移植を融合した臓器修復再生法の開発

氧灌注与Muse细胞移植相结合的心脏骤停肝脏器官修复再生方法的建立

• 批准号: 21K08636
• 负责人: 宮城 重人
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08636/
• 关键词: Muse細胞; 過小グラフト; 心停止ドナーグラフト; 酸素化灌流; 類洞微小循環

正常肝のラット20％過小グラフト移植モデルを作成し、こちらにヒトMuse 細胞および間葉系幹細胞（MSC)のブースト細胞移植モデルを付加する研究を継続した。ブースト移植細胞数を、MSC40万個、Muse40万個、MSC500万個（MSC500万個中にMuse40万が存在すると想定できる）で比較検討を継続した。過小グラフト肝移植＋ブースト細胞移植のモデルは既に当科で確立されているため、生存率には有意差が出なかったのは報告済である。しかし肝再生速度と肝代謝能力（ICG検査）の検討にてMuse40万個移植群は他群に比し有意にICG消失率が良好であった。ICG検査が、MSC500万群で改善が不十分なのにMuseだけ改善した理由として、肝臓内の血流が改善した可能性を考え（MSC500万群では細胞数が多すぎてかえって類洞閉塞した可能性を考えた）、臓器透明化技術を用いて肝類洞画像を撮影した。術後3日目のラットに蛍光標識デキストランを注射し、肝臓を摘出後、4%PFAにて浸漬固定。そのごCUBIC protocolを用い肝臓を透明化し多光子共焦点レーザー顕微鏡にて3次元類洞画像を撮影。ImageJによる連続した平均類洞体積・表面積測定にて、類洞の開存性および連続性がMuse細胞40万投与でMSCに比し有意に改善していることが解った。さらに、Muse細胞はMSCと比較してHGF、VEGFAを高発現していることが新たに分かった。このためMuse細胞の類洞保護効果がHGFやVEGFAによるものと想定できた。心停止ドナー肝グラフトに酸素化灌流を施行する類洞保護モデルもラットとブタで確立した。ラットにて心停止ドナー無処置再灌流群と酸素化後の再灌流群で比較研究を開始した。また酸素化後の再灌流時に細胞ブーストを行う実験モデルも確立した。

Study on the preparation and development of Muse cells and mesenchymal stem cells (MSC) for transplantation of 20% normal liver tissue The number of transplanted cells, MSC 400,000, Muse 400,000, MSC 5 million (MSC 5 million, Muse 400,000 exist) are compared and discussed. The results of liver transplantation and cell transplantation were well established, and the survival rate was significantly lower. The rate of liver regeneration and liver metabolic capacity (ICG test) was evaluated in 400,000 Muse transplant groups, compared with other groups, and the rate of ICG disappearance was excellent. ICG examination, MSC 5 million population improvement, Muse improvement reasons, liver blood flow improvement possibility (MSC 5 million population, cell number increase), organ transparency technology, liver cavity imaging 3 days after surgery, the liver was extracted and fixed by 4% PFA. The CUBIC protocol is used for transparency, multiphoton confocal imaging, and 3D hole-like imaging. ImageJ is a continuous process for measuring the average cavity-like volume and surface area, and the cavity-like opening and connectivity are intentionally improved compared with 400,000 cells of MSC. Muse cells are more efficient than HGF cells and VEGFA cells. The effect of HGF and VEGFA on the protection of Muse cells The heart stops at the heart of the liver, and the liver stops at the heart of the liver. A comparative study of reperfusion without treatment and reperfusion after acidification was initiated. When the cells are reperfused after acidification, they will be established.

项目成果

局所進行肝門部領域胆管癌に対する 肝移植の適応と生体移植用治療戦略

局部晚期肝门部胆管癌肝移植适应证及活体移植治疗策略

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮城重人;藤尾淳;戸子台和哲;柏舘俊明;宮澤恒持;佐々木健吾; 松村宗幸;宮崎勇希;山名浩樹;青木修一;中川圭;森川孝則 亀井尚;海野倫明
• 通讯作者: 海野倫明

Oxygenated Hypothermic Machine Perfusion of Kidney Transplantation from Donors After Cardiac Death Due to Long-Term Low Blood Pressure and Hypoxia: The First Case Report of a Clinical Trial Using a New Japanese Perfusion System.

长期低血压和缺氧导致心脏死亡后供体肾移植的氧合低温机灌注：使用新型日本灌注系统的临床试验的首例病例报告。

• 发表时间: 2022
• 期刊: Transplant Proc. 2022 Mar;54(2):225-229.
• 作者: Shigehito Miyagi 1;Toshiaki Kashiwadate 2;Hiroyasu Nishimaki 2;Kazuaki Tokodai 2;Atsushi Fujio 2;Koji Miyazawa 2;Kengo Sasaki 2;Muneyuku Matsumura 2;Michiaki Unno 2;Takashi Kamei 2;Naoto Matsuno.
• 通讯作者: Naoto Matsuno.

局所進行肝門部領域胆管癌に対する 肝移植適応の検討

局部晚期肝门部胆管癌适应肝移植的思考

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮城重人;戸子台和哲;藤尾淳;柏舘俊明;宮澤恒持; 佐々木健吾;松村宗幸;宮崎勇希;山名浩樹;青木修一;中川圭; 亀井尚;海野倫明
• 通讯作者: 海野倫明

心停止ドナー肝移植にむけた灌流研究をベースとした東北大学の歩み

东北大学心脏骤停供体肝移植灌注研究取得进展

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮城重人;柏舘俊明;柿崎裕太;米田海;宮澤恒持;王宏昇;清水健司;笹嶋秀憲;菖野佳浩;西牧宏泰;滝戸成人;戸子台和哲;藤尾淳;佐々木健吾;松村宗幸; 亀井尚;海野倫明
• 通讯作者: 海野倫明

The first report of a Japanese clinical trial for oxygenated hypothermic machine perfusion on for kidney transplantation from donors after cardiac death.

日本第一份临床试验报告，用于心脏死亡后供体肾移植的氧合低温机灌注。

• 发表时间: 2021
• 作者: Shigehito Miyagi1;Toshiaki Kashiwadate1;Hiroyasu Nishimaki1;Kazuaki Tokodai1;Wataru Nakanishi1;Ryuichi Nishimura1;Atsushi Fujio1;Kengo Sasaki1;Michiaki Unno1;Takashi Kamei1;and Naoto Matsuno2
• 通讯作者: and Naoto Matsuno2