バイオ人工臓器研究における(膜型)レクチンの制御機能の利用
(膜型)凝集素的调节功能在生物人工器官研究中的利用
基本信息
- 批准号:21K08665
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
肺胞サーファクタントSP-Aに目をつけ、そのCRD(糖鎖認識部位)部分を膜型レクチンの一つであるCL-1のCRDに置き換え、pCXN2-Vectorのcloning siteに挿入、pCXN2/CL-SP-Aを作成し、FACSでその発現を確認した。前回はヒトmonocyte/macrophageのcell lineであるTHP-1を使い、ブタ血管内皮細胞(SEC)に対する障害率を検討した。今回はヒト抹消血からの顆粒球(PBMC)を取り出し、M-CSF(100ng/mL)を加え5日間培養しmacrophageに誘導した後、FACSにてCD14の発現を確認し、同時にSIRPaの発現を検証した。CL-SP-Aによるphagocytosis(貪食)に対する抑制効果を検討した。SECに対するヒトmacrophageの貪食率は約75%であったのに対し、SEC/CL-SP-Aに対しては約30%以下の値を示した。また、続いてROS産性能を検討した、SECの場合を100%とすると、SEC/CL-SP-Aでは約75%程度に落ちていた。さらに、反応の際のmacrophageでのサイトカイン産性能についてはmRNAを取りrt-PCR法で測定した、SEC/CL-SP-Aに対する場合は、SECに対する場合と比べて、IL-1bの産生に変化は示さなかったが、TNF-aやiNOS/Arg1は有意に下がっていた。一方、IL-10は有意に上昇していた。加えて、THP-1 Lucia NFkB細胞を用いて細胞障害を測定したが、SEC/CL-SP-AではSECに比してやはり有意にNF-kB遺伝子発現がおさえられていた。これらの事から、hybrid分子CL-SP-AがmacrophageのSECに対する攻撃の際、その抑制に有効であることが証明された。
The CRD of CL-1 was replaced by a membrane type CRD, the cloning site of pCXN2-Vector was inserted, pCXN2/CL-SP-A was created, and FACS was confirmed. In the past, the damage rate of THP-1 in monocyte/macrophage cell line was discussed. In the present study, the presence of CD14 was confirmed by FACS after 5-day culture with M-CSF(100ng/mL) and the presence of SIRPa was detected. CL-SP-A is a very effective way to control food consumption. SEC macrophage gluttony rate is about 75%, SEC/CL-SP-A is about 30% For SEC applications, ROS production performance is 100%, SEC/CL-SP-A is approximately 75%. In addition, the production of IL-1b, TNF-a and iNOS/Arg1 was determined by rt-PCR, SEC/CL-SP-A, SEC and other methods. One side, IL-10 intentionally rose. Add to cart, THP-1 Lucia NFkB cells in the middle of the cell damage assay, SEC/CL-SP-A SEC ratio, intentionally NF-kB gene development in the middle of the day The hybrid molecule CL-SP-A is proved to be an effective inhibitor of macrophage-related SEC attacks.
项目成果
期刊论文数量(11)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Suppression of xenogeneic innate immune response by a membrane-type human surfactant protein-A.
- DOI:10.3892/etm.2022.11527
- 发表时间:2022-07
- 期刊:
- 影响因子:2.7
- 作者:Chiyoshi Toyama;A. Maeda;Shuhei Kogata;Riho Yamamoto;Kazunori Masahata;T. Ueno;Masafumi Kamiyama;Y. Tazuke;H. Eguchi;H. Okuyama;S. Miyagawa
- 通讯作者:Chiyoshi Toyama;A. Maeda;Shuhei Kogata;Riho Yamamoto;Kazunori Masahata;T. Ueno;Masafumi Kamiyama;Y. Tazuke;H. Eguchi;H. Okuyama;S. Miyagawa
The suppression of macrophage-mediated intestinal transplant rejection by C5a receptor antagonist.
C5a 受体拮抗剂抑制巨噬细胞介导的肠移植排斥反应。
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Chiyoshi Toyama;Akira Maeda;Shuhei Kogata;Koki Takase;Tasuku Kodama;Kazunori Masahata;Takehisa Ueno;Masafumi Kamiyama;Yuko Tazuke;Hiroshi Eguchi;Katsuyoshi Matsunami;Shuji Miyagawa;Hiroomi Okuyama
- 通讯作者:Hiroomi Okuyama
CPISPR / Cas3 system for pig Gal-T (GGTA1)
猪 Gal-T (GGTA1) 的 CISPPR / Cas3 系统
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shuji Miyagawa;Masahito Watanabe;Kazuki Sato;Shuhei Kogata;Chiyoshi Toyama;Kazunori Masahata;Masafumi Kamiyama;Hiroshi Eguchi;Akira Maeda;Kazuto Yoshimi;Tomoji Mashimo;Hiroomi Okuyama;Hiroshi Nagashima
- 通讯作者:Hiroshi Nagashima
Effect of a C5a receptor antagonist on macrophage function in an intestinal transplant rat model
- DOI:10.1016/j.trim.2022.101559
- 发表时间:2022-03-21
- 期刊:
- 影响因子:1.5
- 作者:Toyama,Chiyoshi;Maeda,Akira;Okuyama,Hiroomi
- 通讯作者:Okuyama,Hiroomi
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正畠 和典其他文献
青年期に再発を来した肝芽腫に対しての生体部分肝移植術 当院の肝芽腫に対する肝移植術と比較して
活体部分肝移植治疗青春期复发的肝母细胞瘤与我院肝母细胞瘤肝移植的比较。
- DOI:
- 发表时间:
2014 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
上野 豪久;山道 拓;梅田 聡;大割 貢;正畠 和典;奈良 啓悟;上原 秀一郎;大植 孝治;臼井 規朗 - 通讯作者:
臼井 規朗
正畠 和典的其他文献
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相似海外基金
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- 批准号:
20016025 - 财政年份:2008
- 资助金额:
$ 2.66万 - 项目类别:
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