The role and mechanism of VEGFR2 on aortic valve calcification

VEGFR2在主动脉瓣钙化中的作用及机制

• 批准号: 21K08813
• 负责人: 于 在強
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08813/
• 关键词: 大動脈弁石灰化; 大動脈弁狭窄症; 薬物治療; 動脈硬化; 血管内皮増殖因子受容体2; 異所性石灰化

大動脈弁狭窄症患者の石灰化した大動脈弁より大動脈弁間質細胞を単離した。これらの細胞の性質を解析したところ、ほぼ全て血管内皮細胞増殖因子受容体（VEGFR2）陽性を示し、かつ石灰化しやすい性質を認めた。さらに、VEGFR2陽性の大動脈弁間質細胞は腫瘍壊死因子TNFーαに対して感受性が高いことを証明した。これを石灰化モデルとし、弁石灰化を抑制する薬物の開発を進めた。VEGFR2陽性の間質細胞をTNFーαで刺激して石灰化が亢進するが、黄蓮解毒湯（10－30 μg/mL ）との共存培養すると、TNFーαによる石灰化が有意に抑制された。さらに、TNFーαによるALP活性の上昇も有意に抑制した。また、黄蓮解毒湯は黄蓮と黄檗等の４種類の生薬を有するため、それぞれの弁石灰化に対する作用を調べた。その結果、黄蓮と黄檗は黄蓮解毒湯と同様にTNFーα誘発性石灰化とALP活性の上昇を有意に抑制した。黄蓮解毒湯の生薬：黄蓮と黄檗はメインにベルベリンを有することが報告されていた。このベルベリンは抗炎症作用があるため、TNFーα誘発性石灰化に対する影響を調べた結果、ベルベリンは有意にTNFーα誘発性石灰化の亢進を抑制し、さらにALP活性の上昇及び骨形成因子BMP2の発現亢進を有意に抑制した高血圧SHRラットを飼育し、２７週齢より黄蓮解毒湯（1mg /mL）を給水で投与開始した。大動脈弁石灰化の有無を小動物用超音波装置で観察した。黄蓮解毒湯投与７週間後に実験動物を犠牲にして心臓及び大血管を摘出し、Von Kossa染色法で弁石灰化を評価した。その結果、黄蓮解毒湯非投与群（n＝4）のSHRラットの大動脈弁に多くのVon Kossa染色陽性の領域を認めたが、黄蓮解毒湯投与群（n＝4）のSHRラットの大動脈弁にはVon Kossa染色陽性の領域が黄蓮解毒湯非投与群に比較して有意に減少した。

Arterial stenosis patients are calcified, and arterial stromal cells are isolated. The analysis of the properties of these cells shows that all vascular endothelial cell growth factor receptors (VEGFR2) are positive and calcified. The high sensitivity of VEGFR-2 positive vascular stromal cells to TNF-α was demonstrated. The development of liming and liming products VEGFR-2-positive stromal cells were stimulated by TNF-α and calcified. Huanglian Jiedu Decoction (10-30 μg/mL) and blue-shift culture were stimulated by TNF-α and calcified. The increase in ALP activity was intentionally suppressed by TNF-α. The effects of liming on the growth and metabolism of four kinds of plants, such as Huanglian and Huangmu, were studied. As a result, the increase of TNF-α-induced calcification and ALP activity was intentionally suppressed. Huang Lian Detoxification Decoction: Huang Lian and Huang Bo are the main ingredients for the preparation of this report. The anti-inflammatory effect of TNF α on TNF α-induced calcification was investigated. The results showed that TNF α-induced calcification was inhibited intentionally. The increase of ALP activity and the increase of bone morphogenetic factor BMP2 expression were inhibited intentionally. At 27 weeks, Huanglian Jiedu Decoction (1mg /mL) was administered to and started feeding. The presence or absence of calcification in the aorta can be detected by ultrasonic devices for small animals. After 7 weeks of Huanglian Jiedu Decoction administration, the heart and large blood vessels of the animals were extracted and evaluated by Von Kossa staining The results showed that the number of Von Kossa staining positive areas of SHR in group (n = 4) was significantly lower than that in group (n=4).