Development of a novel lymphatic regeneration therapy by direct reprogramming

通过直接重编程开发新型淋巴再生疗法

基本信息

  • 批准号:
    21K08833
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.5万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

次世代再生医療であるダイレクト・リプログラミング(D-reP)技術を利用した、発生学的に同系列である静脈をリンパ管へと誘導するリンパ浮腫新規治療法の開発研究である。先行研究の結果からD-reP因子としてProx1とVEGFR-3が候補となることを見出した。しかしD-rePが上手く誘導できたかを確認するためのマーカーが必要である。そこでリンパ管内皮細胞(LEC)、伏在静脈内皮細胞(HSaVEC)、HUVECの3細胞培養系を用いて血管、リンパ管のマーカーとなる遺伝子発現について検索した。候補とした遺伝子は以下である;Prox1、HGF、Met、LYVE-1、Ets-1、Ets-2、VEGF-A、Sox18、 VEGFR-3、TGF-b1、FoxC2、ANGPT2、VEGF-C。これらのうちに常にLECでHSaVECとHUVECの両方より高発現していたのはProx1、VEGFR-3、ANGPT2、LYVE-1の4遺伝子のみであった。Prox-1とVEGFR-3はD-reP因子として利用することとしているため、ANGPT2とLYVE-1の発現によって確認することとした。さらにHSaVECにProx-1、VEGFR-3、Prox-1+VEGFR-3プラスミドを遺伝子導入しそれぞれの遺伝子が十分に発現するかをreal time PCRで確認した。 その結果、GFP導入群に比較してD-reP因子候補遺伝子が5日目まで十分に発現していることを確認した。さらにHSaVECにProx-1、VEGFR-3、Prox-1+VEGFR-3プラスミドを遺伝子導入し,マーカーとしたANGPT2とLYVE-1の遺伝子発現をreal time PCRで確認した。Prox-1、VEGFR-3の発現上昇を認めたが、ANGPT2とLYVE-1の発現に変化はなくHSaVECをLECへと誘導することはできなかった。
Nextgen regenerative medical で あ る ダ イ レ ク ト · リ プ ロ グ ラ ミ ン グ を (D - reP) technology using し た, 発 born with series で に あ る vein を リ ン パ tube へ と induced す る リ ン パ dropsy の 発 open new rules therapy research で あ る. The results of the prior study <s:1> と らD-reP factor と て てProx1とVEGFR-3が candidate となる となる とを とを show that た た. し か し D - reP が overhand く induced で き た か を confirm す る た め の マ ー カ ー が necessary で あ る. そ こ で リ ン パ tube skin cell (LEC), v in the venous endothelial cells (HSaVEC), HUVEC の 3 cell culture system を with い て blood vessels, リ ン パ tube の マ ー カ ー と な る posthumous son 伝 発 now に つ い て 検 cable し た. The alternate と た 伝 伝 the following である; Prox1, HGF, Met, LYVE-1, Ets-1, Ets-2, VEGF-A, Sox18, VEGFR-3, TGF- β b1, FoxC2, ANGPT2, VEGF-C. こ れ ら の う ち に often に LEC で HSaVEC と HUVEC の struck party よ り high 発 now し て い た の は Prox1, VEGFR - 3, ANGPT2, LYVE 1 の 4 legacy 伝 son の み で あ っ た. Prox - 1 と VEGFR 3 は D - reP factor と し て using す る こ と と し て い る た め, ANGPT2 と LYVE 1 の 発 now に よ っ て confirm す る こ と と し た. And VEGFR さ ら に HSaVEC に Prox - 1-3, + VEGFR Prox - 1-3 プ ラ ス ミ ド を heritage 伝 son import し そ れ ぞ れ の heritage 伝 が son very に 発 now す る か を real time PCR で confirm し た. そ の results, GFP import group に し て D - reP factor alternate posthumous son 伝 が 5 orders ま で very に 発 now し て い る こ と を confirm し た. さ ら に HSaVEC に, VEGFR Prox - 1-3, + VEGFR Prox - 1-3 プ ラ ス ミ ド を heritage 伝 import し, マ ー カ ー と し た ANGPT2 と LYVE 1 の heritage 伝 son 発 now を real time PCR で confirm し た. And VEGFR Prox - 1-3 の 発 now rising を recognize め た が, ANGPT2 と LYVE 1 の 発 に now - the は な く HSaVEC を LEC へ と induced す る こ と は で き な か っ た.

项目成果

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专著数量(0)
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