リンパ管新生の検討と癌由来の血管、リンパ管新生抑制遺伝子の探索

检查淋巴管生成并寻找癌源性血管和淋巴管生成抑制基因

• 批准号: 07J02800
• 负责人: 齊藤 幸裕
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J02800/
• 关键词: 血管新生; リンパ管新生; 遺伝子治療; 癌転移

癌の増殖、転移には癌由来の血管、リンパ管新生因子が関与するため、これらの制御は予後向上のための治療標的となる。そこで我々は癌由来の抗血管、リンパ管新生制御因子を探索するため研究を行った。マウス肺癌LL/2細胞よりcDNAライブラリーを構築し、独自のHVJ-Eを用いたHigh Throughput Functional Screeningにより増殖抑制候補遺伝子cold shock domain protein A(CSDA)を特定した。CSDAは血管内皮細胞(HAEC)、リンパ管内皮細胞(LEC)両方の増殖能を抑制した(c-fos promoter assay;84.9%inhibition in HAEC,97.3%inhibition in LEC under10%FBS condition)。正常組織では骨格筋と心臓に特異的に高発現し、血管・リンパ管内皮細胞にもわずかに発現していることを確認した。細胞内局在は主として核であった。Deletion mutantによる検討により、この増殖抑制活性にはcold shock domainが必須であることを確認した。CSDAの増殖抑制の作用機序として、既報のHypoxia inducible factor-1の作用抑制に加えて、serum response region(SRE)を抑制することを確認した(SRE assay:45.1%inhibition in HAEC,97.0%inhibition in LEC under10%FBS condition)。生体でのCSDAの作用を確認するために、マウス背部皮下にLL/2細胞を移植した担癌マウスモデルにCSDAを反復して遺伝子導入すると、腫瘍周辺の血流低下と転移減少の傾向を認めた。CSDAは血管、リンパ管新生を同時に抑制しうる新規の制御遺伝子であり、癌治療の次世代の治療戦略となりうることが示唆された。さらに我々はCSDAが正常心筋、骨格筋に発現していることに着目した。検討の結果CSDAは心筋、骨格筋において血管新生の内因性制御因子として機能していることが明らかとなり、これをノックダウンすることで増殖因子を添加することなしで、血管新生を誘導することが可能なことを見出した。またCSDAは癌化の過程で、白血病、子宮癌、肺癌、大腸癌、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺癌で発現することがわかった。このことはCSDAが癌の発生、進展に機能を有していることを示唆しており、新たな腫瘍マーカー、悪性度診断マーカーとなりうる可能性があることを示している。

Cancer growth, migration, angiogenesis, tumor control and treatment The study of anti-vascular, anti-angiogenesis and anti-angiogenesis factors in the origin of cancer Lung cancer LL/2 cell line cDNA library construction, independent HVJ-E use High Throughput Functional Screening, proliferation inhibition candidate cold shock domain protein A(CSDA) specific CSDA inhibited proliferation of HAEC and LEC (c-fos promoter assay;84.9%inhibition in HAEC, 97.3%inhibition in LEC under 10%FBS condition). Normal tissue, bone, muscle and heart specific high levels of vascular endothelial cells, vascular endothelial cells. The inner part of the cell is the nucleus. Deletion mutant detection, growth inhibition activity, cold shock domain The mechanism of CSDA proliferation inhibition was confirmed by the addition of the previously reported Hypoxia inducible factor-1 inhibition and serum response region(SRE) inhibition (SRE assay:45.1%inhibition in HAEC, 97.0%inhibition in LEC under 10%FBS condition). The role of CSDA in vivo was confirmed by the transplantation of LL/2 cells subcutaneously in the back and the tendency of decreased blood flow and migration around the tumor. CSDA is a new method to control the proliferation of blood vessels and vessels, and to treat cancer in the next generation. Today, we have CSDA and normal heart muscle, bone muscle and bone muscle development. The result of CSDA is that the endogenous control factors of angiogenesis in the heart and bone are increased. CSDA is a process of cancer, leukemia, uterine cancer, lung cancer, colorectal cancer, melanoma, thyroid cancer. CSDA has the function of cancer development and progression, and the possibility of cancer diagnosis.

项目成果

Cold shock domain protein A represses angiogenesis and lymphangiogenesis via inhibition of serum response element

• DOI: 10.1038/sj.onc.1210824
• 发表时间: 2008-03
• 期刊: Oncogene
• 影响因子: 8
• 作者: Y. Saito;H. Nakagami;M. Kurooka;Y. Takami;Y. Kikuchi;H. Hayashi;T. Nishikawa;K. Tamai;R. Morishita;N. Azuma;T. Sasajima;Y. Kaneda

心筋虚血時の Cold shock domain protein Aによる血管新生調節機構

心肌缺血过程中冷休克结构域蛋白A对血管生成的调节

• 发表时间: 2008
• 作者: Saito Y;Nakagami H;Morishita R;Sasajima T;Kaneda Y;et. al.;齊藤幸裕
• 通讯作者: 齊藤幸裕

新規血管・リンパ管新生抑制分子Cold shock domain protein A-新規分子を用いた癌増殖、転移抑制への次世代の治療戦略-

冷休克结构域蛋白 A，一种抑制新血管和淋巴管生成的分子 - 使用新分子抑制癌症生长和转移的下一代治疗策略 -

• 发表时间: 2007
• 作者: Saito Y;Nakagami H;Morishita R;Sasajima T;Kaneda Y;et. al.;齊藤幸裕;齊藤 幸裕
• 通讯作者: 齊藤 幸裕