肺がんの抗がん剤抵抗性に関与する新規遺伝子の同定を目指したRNA修飾酵素の解析

分析RNA修饰酶，旨在鉴定与肺癌抗癌耐药性相关的新基因

• 批准号: 21K08883
• 负责人: 原田 栄二郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08883/
• 关键词: 抗癌剤抵抗性; RNA修飾酵素; RNA修飾

本年度は、日本人由来のヒト扁平上皮癌細胞株 RERF-LC-AIに対して、ドセタキセルおよびペメトレキセドを添加培養した時の、RNA修飾酵素の発現レベルをqPCRで解析した。RERF-LC-AIにドセタキセルおよびペメトレキセドを100ｎMの濃度でそれぞれ添加して、48時間培養し、細胞からtotal RNAを抽出し、代表的な12種類のRNA修飾酵素の遺伝子発現レベル(AHCY、ALKBH5、FTO、HENMT1、HNRNPC、NSUN2、PNP、RNMT、TRMT6、TRMT61A、YTHDF2、METTL3) をqPCRで解析した。ドセタキセルの添加では、12種類の遺伝子のうちAHCY、FTO、TRMT61A、YTHDF2の4種類の遺伝子の発現がコントロールに比べ10倍以上上昇した。ペメトレキセドの添加では12種類の遺伝子のうちAHCY、FTO、HENMT1、HNRNPCの4種類の遺伝子の発現がコントロールに比べ10倍以上上昇した。発現が上昇した4種類の遺伝子（AHCY、FTO,YTHDF2、TRMT61A）を個別にノックダウンする為に、遺伝子の標的配列をin silico解析から、個々の遺伝子に対して3種類ずつ選択し、shRNAウイルスベクターを作製した。

This year, the expression of RNA modifying enzymes in Japanese derived squamous cell carcinoma cell line RERF-LC-AI was analyzed by qPCR. RERF-LC-AI was used to detect the mRNA expression of 12 types of RNA modifying enzymes (AHCY, ALKBH5, FTO, HENMT1, HNRNPC, NSUN2, PNP, RNMT, TRMT6, TRMT 61A, YTHDF2, METTL3) at concentrations of 100nM, 48-hour incubation, total RNA extraction, and qPCR analysis. In addition, the occurrence of 4 kinds of genes, including AHCY, FTO, TRMT61A and YTHDF, increased by more than 10 times compared with that of other genes. In addition, the occurrence of 12 kinds of genes, such as AHCY, FTO, HENMT1 and HNRNPC, increased by more than 10 times compared with that of other genes. Four types of vectors (AHCY, FTO,YTHDF2, TRMT 61A) were found to rise individually, and the target sequences of vectors were analyzed in silico, and three types of vectors were selected and controlled by shRNA.

项目成果

Autologous transplantation of multilayered fibroblast sheets prevents postoperative pancreatic fistula by regulating fibrosis and angiogenesis.

多层成纤维细胞片的自体移植通过调节纤维化和血管生成来预防术后胰瘘。

• 发表时间: 2021
• 期刊: Am J Transl Res
• 影响因子: 2.2
• 作者: Iwamoto K;Saito T;Takemoto Y;Ueno K;Yanagihara M;Furuya-Kondo T;Kurazumi H;Tanaka Y;Taura Y;Harada E;Hamano K
• 通讯作者: Hamano K

自家積層線維芽細胞シート移植による術後食道吻合部の組織修復への影響

自体层状成纤维细胞片移植对食管吻合术后组织修复的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 岩本圭亮;上野耕司;田中裕也;竹本圭宏;原田栄二郎;濱野公一
• 通讯作者: 濱野公一

高齢者胃癌に対する腹腔鏡下胃全摘術の予後

腹腔镜全胃切除术治疗老年胃癌的预后

• 发表时间: 2021
• 作者: 原田栄二郎;田中裕也;竹本圭宏;濱野公一
• 通讯作者: 濱野公一

E-PASSから見た高齢者上部胃癌に対する腹腔鏡下胃切除術の短期・長期成績

从 E-PASS 观察老年患者腹腔镜胃切除术治疗上段胃癌的短期和长期结果

• 发表时间: 2022
• 作者: 原田栄二郎;岩本圭亮;佐藤陽子;田中裕也;竹本圭宏;濱野公一
• 通讯作者: 濱野公一

高齢者（80歳以上）に対する腹腔鏡下直腸癌手術の治療成績

老年患者（80岁以上）腹腔镜直肠癌手术治疗效果

• 发表时间: 2022
• 作者: 原田栄二郎;岩本圭亮;田中裕也;竹本圭宏;濱野公一
• 通讯作者: 濱野公一