The role of macrophages in chronic rejection after lung transplantation and regulatioon of macrophage activities by FROUNT inhibition

巨噬细胞在肺移植后慢性排斥反应中的作用及FROUNT抑制对巨噬细胞活性的调节

基本信息

批准号：
21K08898
负责人：
佐藤雅昭
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08898/
关键词：
肺移植拒絶マクロファージ拒絶反応慢性拒絶ケモカイン

项目摘要

肺移植後の急性拒絶反応は、長期生命予後に影響を及ぼす慢性拒絶の危険因子となり得る。近年、本拒絶の病態解明が進み、リンパ球のみならずマクロファージによっても惹起される可能性が提唱されている。抗酒癖薬であるジスルフィラム（Disulfiram, DSF）は、マクロファージの細胞遊走シグナルを促進する細胞内制御分子 FROUNT の阻害薬である。今回、DSF をラット肺移植後急性拒絶モデルに投与しvehicleコントロールと比較したところ、各群の A grade スコア（末梢肺での拒絶スコア）の中央値は各々、コントロール群で Grade A2.5、DSF群でGrade A2 であり、両群間で差はなかった（p=0.321）。しかし気道の拒絶を表すB grade はコントロール群で Grade B2R、DSF群でGrade B1RでありB grade は両群間で統計学的に有意差が認められた（p=0.0031）。免疫染色では、CD68 陽性マクロファージ数と CD3 陽性 T 細胞数は、DSF群においてコントロール群よりも優位に少なかった（p=0.0001, p=0.0029）。移植肺の気管支肺胞洗浄中のマクロファージの割合はDSF群で有意に少なかった（p=0.032）。発現変動遺伝子の検出（DEG 解析）ではDSF群の炎症性サイトカイン IL-6 の遺伝子発現低下やマクロファージ関連遺伝子(CD86, CD163)の発現低下、関連ケモカイン（CCL2, CCL7)の発現低下がみられ、抗炎症サイトカインIL-10の遺伝子発現の上昇傾向を認めた。以上より、本研究ではラット肺移植モデルにおいて、DSF投与によるマクロファージの遊走抑制とリンパ球性細気管支炎（気管支の拒絶）の軽減が得られることを示した。

肺移植后的急性排斥反应可能是慢性排斥反应的危险因素，这会影响长期的生命预后。近年来，这种排斥反应的病理已经进展，并且已经提出，不仅可以由淋巴细胞诱导，而且还可以由巨噬细胞诱导。二硫仑（DSF）是一种抗酒精性药物，是Frount的抑制剂，Frount是一种细胞内调节分子，可促进巨噬细胞中的细胞迁移信号。在这项研究中，在肺移植后将DSF施用到急性排斥模型，并与媒介物对照组进行比较，并且在对照组中，每组A2.5中的A级分数中位数A2.5是DSF组的A2.5，并且两组之间没有差异（P = 0.321）。但是，代表气道排斥的B级在对照组中为B2R，在DSF组中为B1R，B级在两组之间具有统计学意义（P = 0.0031）。在免疫染色中，与对照组相比，DSF组的CD68阳性巨噬细胞和CD3阳性T细胞的数量低于DSF组（P = 0.0001，P = 0.0029）。在移植肺中支气管肺泡灌洗过程中巨噬细胞的比例显着降低（p = 0.032）。可变表达基因（DEG分析）的检测表明，DSF组炎症细胞因子IL-6的基因表达降低，巨噬细胞相关基因表达的降低（CD86，CD163）的表达降低，以及相关趋化因子表达的降低（CCL2，CCL7），以及基因的表达增加，抗基因cytok cytok cytok cytik cyti cyti cyt cyti cytim cyt cyti cytim cyt cytim cytim cytim cytim cyt cytim cytim cyt cyt。从上面的研究中，这项研究表明，在大鼠肺移植模型中，DSF给药可以减少巨噬细胞的迁移和淋巴细胞性支气管炎（支气管排斥）。