Elucidation of the function of extracellular matrix proteins in sepsis

阐明细胞外基质蛋白在脓毒症中的功能

基本信息

批准号：
21K09066
负责人：
栗田健郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

網羅的な遺伝子多型解析により, 細胞外マトリックスタンパク質SVEP1が敗血症重症化因子として同定された. SVEP1は細胞間接着や胎生期のリンパ管形成に重要な機能を果たすことが明らかとなってきたが, 未だ機能の全容は解明されておらず, 敗血症における動態や機能はほとんど解明されていない. 本研究では敗血症におけるSVEP1の機能を明らかにすることを目的とした.まず, 野生型C57BL/6マウスを用い, コントロールである手術なしモデル(no surgery: N.S.), 単開腹モデル(Sham), 腹腔内敗血症モデル(盲腸結紮穿孔, cecal ligation and puncture: CLP)の各群における, 肺でのSVEP1の遺伝子発現(qRT-PCR法)やタンパク質量(Western-blot法), 細胞ごとのSVEP1の動的変化(Flowcytometry)を比較した. 結果, 敗血症により, 肺でのSVEP1遺伝子発現やタンパク質量が減少することが明らかとなった. また, 肺において敗血症の早期に, SVEP1を有する血管内皮細胞やリンパ管内皮細胞が減少することが明らかとなった. これらの結果からSVEP1の動態を評価する上で, 肺の血管内皮細胞やリンパ管内皮細胞がターゲットになると考えられた.これらをふまえ, SVEP1に関する遺伝子型の異なるモデルを用い, 敗血症刺激による生存率など生体反応の差異や各種mediatorの動態の差異, 肺の血管内皮細胞・リンパ管内皮細胞の応答の差異を評価する研究の準備を開始した. SVEP1に関する遺伝子多型を有するSVEP1遺伝子多型マウス(Gln581His)をCrispr-Cas9法で作成し, 継代によりSVEP1遺伝子多型マウス(Gln581His)のヘテロ型・ホモ型の確保に成功した.

广泛的遗传多态性分析表明，细胞外基质蛋白SVEP1是导致脓毒症的因素。已经揭示了SVEP1在胎儿期间的细胞间粘附和淋巴管发生起着重要功能，但尚未阐明其功能的全部功能，并且尚未阐明败血症的动态和功能。这项研究旨在阐明SVEP1在败血症中的功能。首先，使用野生型C57BL/6小鼠来确定SVEP1在败血症中的功能。首先，在野生型C57BL/6小鼠中，对照不是手术（N.S.），单次剖腹手术模型（SHAM）和腹膜内败血症模型（Cecal结扎和穿刺和穿刺（CLP）。我们比较了SVEP1基因表达（QRT-PCR方法）（QRT-PCR方法）和蛋白质含量（flof ass absy Assement）（sestry asby a as as as as as s s s s s s s s s s s s s s s s s s s s s s s s sve in s s。结果表明，SVEP1基因的表达和蛋白质含量在肺部降低这些，我们为SVEP1使用了不同的基因型模型，并且生物反应的差异（例如由于脓毒症刺激而引起的存活率，以及各种介体制备的动力学差异。使用CRISPR-CAS9方法制备了具有与SVEP1相关的基因多态性的SVEP1基因多态性小鼠（GLN581HIS），并通过通道成功地确保了SVEP1基因多态性小鼠（GLN581HIS）的SVEP1基因多态性小鼠（GLN581HIS）的异性兼性。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

敗血症マウスにおけるSVEP1の動的変化

脓毒症小鼠SVEP1的动态变化

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
栗田健郎;大網毅彦;藤村理紗;坂本明美;幡野雅彦;中田孝明
通讯作者：
中田孝明

Sepsis decreases lung SVEP1 expression in a murine model

脓毒症降低小鼠模型中肺 SVEP1 的表达

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
F1000Research
影响因子：
0
作者：
Takeo Kurita;Takehiko Oami;Lisa Fujimura;Akemi Sakamoto;Ryoko Sato-Nishiuchi;Kiyotoshi Sekiguchi;Masahiko Hatano
通讯作者：
Masahiko Hatano