Elucidation of the function of extracellular matrix proteins in sepsis

阐明细胞外基质蛋白在脓毒症中的功能

• 批准号: 21K09066
• 负责人: 栗田 健郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09066/
• 关键词: 敗血症; SVEP1; 遺伝子多型; 血管透過性; 血管内皮細胞; リンパ管内皮細胞; polydom; 血管内皮

網羅的な遺伝子多型解析により, 細胞外マトリックスタンパク質SVEP1が敗血症重症化因子として同定された. SVEP1は細胞間接着や胎生期のリンパ管形成に重要な機能を果たすことが明らかとなってきたが, 未だ機能の全容は解明されておらず, 敗血症における動態や機能はほとんど解明されていない. 本研究では敗血症におけるSVEP1の機能を明らかにすることを目的とした.まず, 野生型C57BL/6マウスを用い, コントロールである手術なしモデル(no surgery: N.S.), 単開腹モデル(Sham), 腹腔内敗血症モデル(盲腸結紮穿孔, cecal ligation and puncture: CLP)の各群における, 肺でのSVEP1の遺伝子発現(qRT-PCR法)やタンパク質量(Western-blot法), 細胞ごとのSVEP1の動的変化(Flowcytometry)を比較した. 結果, 敗血症により, 肺でのSVEP1遺伝子発現やタンパク質量が減少することが明らかとなった. また, 肺において敗血症の早期に, SVEP1を有する血管内皮細胞やリンパ管内皮細胞が減少することが明らかとなった. これらの結果からSVEP1の動態を評価する上で, 肺の血管内皮細胞やリンパ管内皮細胞がターゲットになると考えられた.これらをふまえ, SVEP1に関する遺伝子型の異なるモデルを用い, 敗血症刺激による生存率など生体反応の差異や各種mediatorの動態の差異, 肺の血管内皮細胞・リンパ管内皮細胞の応答の差異を評価する研究の準備を開始した. SVEP1に関する遺伝子多型を有するSVEP1遺伝子多型マウス(Gln581His)をCrispr-Cas9法で作成し, 継代によりSVEP1遺伝子多型マウス(Gln581His)のヘテロ型・ホモ型の確保に成功した.

な of snare 伝 son polymorphism analytical に よ り, extracellular マ ト リ ッ ク ス タ ン パ ク qualitative SVEP1 が severe sepsis change factor と し て with fixed さ れ た. SVEP1 は cells indirectly with や TaiShengQi の リ ン パ tube forming に important な function を fruit た す こ と が Ming ら か と な っ て き た が, not だ function の full capacity は interpret さ れ て お ら ず, Sepsis における dynamic や function ほとん ほとん ほとん clarification されて な な な. This study で は sepsis に お け る SVEP1 の function を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. ま ず, wild type C57BL / 6 マ ウ ス を い, コ ン ト ロ ー ル で あ る surgery な し モ デ ル (no surgery: N.S.), 単 laparotomy モデ モデ (Sham), intra-abdominal sepsis モデ (cecal ligation and puncture:) CLP) の each group of に お け る, lung で の SVEP1 の posthumous son 伝 発 now (qRT - PCR method) や タ ン パ ク quality (Western blot method), cell ご と の SVEP1 の dynamic variations of the (Flowcytometry) を comparative し た. As a result, sepsis に よ り, pulmonary で の SVEP1 heritage 伝 son 発 now や タ ン パ ク quality が reduce す る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, lung に お い て sepsis の に early, SVEP1 を have す る endothelial cells や リ ン パ tube skin cells が reduce す る こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ ら の results か ら SVEP1 の dynamic を review 価 す る で, lung の endothelial cells や リ ン パ tube skin cells が タ ー ゲ ッ ト に な る と exam え ら れ た. こ れ ら を ふ ま え, SVEP1 に masato す る heritage 伝 sub-type の different な る モ デ ル を い, sepsis stimulus に よ る survival な ど raw body against 応 の differences や various mediator の dynamic の difference, Lung の vascular endothelial cells, リ ン パ tube skin cells の 応 answer の differences を review 価 す る research の preparations begin を し た. SVEP1 に masato す る heritage 伝 son type more を す る SVEP1 heritage 伝 son polymorphism マ ウ ス (Gln581His) を Crispr で into し Cas9 method, Youdaoplaceholder0 generation によ によ SVEP1 successor 伝 multiple types ウス ウス(Gln581His) <s:1> ヘテロ type · ホモ type <e:1> ensure the successful に た of た.

项目成果

Sepsis decreases lung SVEP1 expression in a murine model

脓毒症降低小鼠模型中肺 SVEP1 的表达

• 发表时间: 2023
• 期刊: F1000Research
• 作者: Takeo Kurita;Takehiko Oami;Lisa Fujimura;Akemi Sakamoto;Ryoko Sato-Nishiuchi;Kiyotoshi Sekiguchi;Masahiko Hatano
• 通讯作者: Masahiko Hatano

敗血症マウスにおけるSVEP1の動的変化

脓毒症小鼠SVEP1的动态变化

• 发表时间: 2021
• 作者: 栗田健郎;大網毅彦;藤村理紗;坂本明美;幡野雅彦;中田孝明
• 通讯作者: 中田孝明